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Por que existem pêlos levemente pigmentados esporádicos nos pêlos faciais?


Meu corpo e meus cabelos são totalmente pretos. Até recentemente, eu achava que esse era o caso com meus pelos faciais também, até que notei um pequeno punhado de pelos que iam de castanho claro a laranja-cobre e vermelho-vinho. Existem cabelos que são inteiramente pigmentados assim e se misturam ao longo de seu comprimento entre diferentes cores de pigmentação (por exemplo, existem fios de cobre que têm pontas pretas).

Alguém pode explicar por que isso acontece?

Meus próprios pensamentos são que isso é causado por alguma variação entre os folículos capilares individuais (diferentes tipos / número de receptores nos melanócitos que colorem o cabelo, fazendo com que eles respondam de maneira diferente a várias quantidades de hormônios? Mas então o que está causando a mudança de hormônio no primeiro lugar? Tenho quase certeza de que até recentemente todos os cabelos eram pretos e só recentemente esses cabelos levemente pigmentados surgiram)


Por que existem pêlos levemente pigmentados esporádicos nos pêlos faciais? - Biologia

Sábado, 31 de outubro de 2015

Ryu, T., Spatola, B., Delabaere, L., Bowlin, K., Hopp, H., Kunitake, R., Karpen, G.H. e Chiolo, I. (2015). As quebras heterocromáticas movem-se para a periferia nuclear para continuar o reparo recombinacional. Nat Cell Biol [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26502056
Resumo:
A heterocromatina compreende principalmente sequências repetidas sujeitas a recombinação ectópica prejudicial durante o reparo de quebra de fita dupla (DSB). No Drosófila células, o reparo de recombinação homóloga (HR) 'segura' de quebras heterocromáticas depende de uma via especializada que realoca as sequências danificadas para longe do domínio de heterocromatina antes da invasão da fita. Este estudo mostra que os DSBs heterocromáticos movem-se para a periferia nuclear para continuar o reparo de HR. A relocalização depende de poros nucleares e proteínas da membrana nuclear interna (INMPs) que ancoram os locais de reparo na periferia nuclear por meio das proteínas STUbL / RENi que interagem com Smc5 / Smc6. Tanto o bloqueio inicial para a progressão de HR dentro do domínio de heterocromatina, quanto o direcionamento de sítios de reparo para a periferia nuclear, dependem das ligases SUMO e SUMO E3. Este estudo revela um papel crítico para a SUMOilação na regulação espacial e temporal do reparo de HR em heterocromatina, e identifica a periferia nuclear como um local especializado para reparo de heterocromatina em um eucarioto multicelular.

Dias, G. B., Heringer, P., Svartman, M. e Kuhn, G. C. (2015). Helitrons moldando a arquitetura genômica de Drosophila: enriquecimento de DINE-TR1 em alfa e beta-heterocromatina, emergência de DNA satélite e expressão de piRNA. Chromosome Res [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26408292
Resumo:
Os Drosophila INterspersed Elements (DINEs) constituem um grupo abundante, mas mal compreendido, de Helitrons presentes em várias espécies de Drosophila. A estrutura geral de DINEs inclui dois blocos conservados que podem ou não conter uma região com repetições tandem entre eles. Essas repetições centrais em tandem (CTRs) são semelhantes dentro das espécies, mas altamente divergentes entre as espécies. Este estudo identificou um subconjunto de DINEs, denominado DINE-TR1, que contém CTRs homólogos de aproximadamente 150 bp. DINE-TR1 são encontrados nos genomas sequenciados de várias espécies de Drosophila. No entanto, alta identidade de sequência interespecífica (

88%) é limitado aos primeiros aproximadamente 30 bp de cada repetição em tandem. A análise de sequência sugere transmissão vertical. Os CTRs encontrados em DINE-TR1 expandiram-se independentemente em matrizes semelhantes a DNA de satélite, pelo menos duas vezes em Drosophila. Ao analisar o genoma de Drosophila virilis e Drosophila americana, foi demonstrado que DINE-TR1 é altamente abundante nos limites da heterocromatina pericentromérica, em algumas regiões teloméricas e no cromossomo Y. Também está presente na região centromérica de um autossomo de D. virilis e dispersa em vários sítios eucromáticos em ambas as espécies. Descobriu-se que DINE-TR1 é abundante em agrupamentos de piRNA e pequenos transcritos de RNA derivados de DINE-TR1 (

25 nt) são predominantemente expressos nos testículos e nos ovários, sugerindo direcionamento ativo pela maquinaria piRNA. Essas características sugerem papéis regulatórios mediados por piRNA potenciais para DINEs em escalas locais e do genoma em Drosophila.

Sexta-feira, 30 de outubro

Khuc Trong, P., Doerflinger, H., Dunkel, J., St Johnston, D. e Goldstein, R.E. (2015). A nucleação de microtúbulos corticais pode organizar o citoesqueleto de Drosófila oócitos para definir o eixo ântero-posterior. Elife 4. ID PubMed: 26406117
Resumo:
Muitas células contêm matrizes não centrossomais de microtúbulos (MTs), mas a montagem, organização e função dessas matrizes são mal compreendidas. Este estudo apresenta o primeiro modelo teórico para o citoesqueleto MT não centrossomal em Drosófila oócitos, nos quais bicoid e Oskar Os mRNAs ficam localizados para estabelecer o eixo anterior-posterior do corpo. Limitado por medições experimentais, o modelo mostra que um gradiente simples de nucleação de MT cortical é suficiente para reproduzir a distribuição de MT observada, padrões de fluxo citoplasmático e localização de Oskar e ingênuo bicoid mRNAs. Essas simulações excluem um papel importante para os fluxos citoplasmáticos na localização e revelam uma organização do citoesqueleto MT que é mais ordenada do que se pensava anteriormente. Além disso, a modulação da nucleação de MT cortical induz uma bifurcação na organização do citoesqueleto que é responsável pelos fenótipos de mutantes de polaridade. Assim, o modelo tridimensional deste estudo explica muitas características da rede MT e destaca a importância da nucleação MT cortical diferencial para a formação do eixo.

Radford, S. J., Hoang, T. L., Gluszek, A. A., Ohkura, H. e McKim, K. S. (2015). Conexões de cinetocore lateral e final são coordenadas para atingir a bi-orientação em oócitos de Drosophila. PLoS Genet 11: e1005605. ID PubMed: 26473960
Resumo:
Nos oócitos, onde os centrossomas estão ausentes, os cromossomos direcionam a montagem de um fuso bipolar. As interações entre cromossomos e microtúbulos são essenciais tanto para a formação do fuso quanto para a segregação cromossômica. Este estudo examinou oócitos sem duas proteínas cinetocore, NDC80 e SPC105R, e uma proteína motora associada ao centrômero, CENP-E, para caracterizar o impacto das ligações cinetocoro-microtúbulo na montagem do fuso e segregação cromossômica em oócitos de Drosophila. Foi demonstrado que o início da montagem do fuso resulta das interações cromossomo-microtúbulo que são independentes do cinetocoro. A estabilização do fuso, entretanto, depende dos componentes do fuso central e do cinetocoro. Esta estabilização coincide com mudanças nas ligações cinetocoro-microtúbulo e bi-orientação de homólogos. É proposto que o processo de bi-orientação começa com os cinetocoros movendo-se lateralmente ao longo dos microtúbulos do fuso central em direção às suas extremidades negativas. Este movimento depende de SPC105R, pode ocorrer na ausência de NDC80 e é antagonizado por forças direcionadas da extremidade positiva do motor CENP-E. Ligações de microtúbulos de cinetocoro terminais que dependem de NDC80 são necessárias para estabilizar a bi-orientação de homólogos. Uma descoberta surpreendente foi que SPC105R, mas não NDC80, é necessário para a co-orientação de centrômeros irmãos na meiose I. Juntos, esses resultados demonstram que, em oócitos, anexos cromossomo-microtúbulo dependentes de cinetocore e independentes trabalham juntos para promover a segregação precisa de cromossomos.

Quinta-feira, 29 de outubro

Oswald, M. C., West, R. J., Lloyd-Evans, E. e Sweeney, S. T. (2015). Identificação de toxicidade de alanina na dieta e disfunção de tráfico em um modelo de Drosophila de neuropatia hereditária sensorial e autonômica tipo 1. Hum Mol Genet [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26395456
Resumo:
A neuropatia hereditária sensorial e autonômica tipo 1 (HSAN1) é caracterizada por uma perda da função sensorial periférica distal e motorneuronal, dor neuropática e necrose do tecido. A causa mais comum de HSAN1 é devido a mutações dominantes na subunidade 1 da serina palmitoil-transferase (SPT1). SPT catalisa a condensação de serina com palmitoil-CoA, a etapa inicial na biogênese de esfingolipídeos. Mutações identificadas em SPT1 são conhecidas por reduzir a síntese de esfingolipídeos e gerar promiscuidade catalítica, incorporando alanina ou glicina ao esfingolipídeo precursor para gerar uma base desoxifingóide (DSB). Por que a perda de função em SPT1 ou a geração de DSBs devem gerar déficits na função sensorial distal ainda não está claro. Para resolver essas questões, um modelo de Drosophila de HSAN1 foi gerado. A expressão de dSpt1 com uma mutação relacionada à doença induziu déficits morfológicos no crescimento de sinapses na junção neuromuscular larval, consistentes com uma ação negativa dominante. A expressão do mutante dSpt1 globalmente foi considerada levemente tóxica, mas foi completamente tóxica quando a dieta foi suplementada com alanina, quando DSBs foram observados em abundância. A expressão de dSpt1 mutante em neurônios sensoriais gerou déficits de desenvolvimento na arborização dendrítica com déficits sensoriais concomitantes. Um defeito de tráfego de membrana foi observado em soma de neurônios sensoriais que expressam dSpt1 mutante, consistente com retículo endoplasmático (ER) para bloqueio de Golgi. Foi possível resgatar a função sensorial em neurônios que expressam dSpt1 mutante pela coexpressão de um efetor da função ER-Golgi, Rab1 sugerindo função ER comprometida em neurônios dendríticos afetados por HSAN1. Este modelo de Drosophila identifica uma nova estratégia para explorar os mecanismos patológicos de HSAN1.

White, J. A., Anderson, E., Zimmerman, K., Zheng, K. H., Rouhani, R. e Gunawardena, S. (2015). A Huntingtina regula diferencialmente o transporte axonal de um subconjunto de vesículas contendo Rab in vivo. Hum Mol Genet. ID PubMed: 26450517
Resumo:
A perda de huntingtina (HTT), a proteína da doença de Huntington (HD), demonstrou anteriormente causar defeitos de transporte axonal. Dentro dos axônios, o HTT pode se associar aos motores da cinesina-1 e da dineína diretamente ou por meio de proteínas acessórias para o movimento bidirecional. No entanto, a composição do complexo vesículo-motor que contém HTT durante o transporte axonal é desconhecida. Este estudo analisou o movimento in vivo de 16 Rab GTPases dentro dos axônios larvais de Drosophila e mostrou que o HTT influencia diferencialmente o movimento de um subconjunto particular dessas vesículas contendo Rab. Enquanto a redução de HTT perturbou a motilidade bidirecional de vesículas contendo Rab3 e Rab19, apenas a motilidade retrógrada de vesículas contendo Rab7 foi interrompida com a redução de HTT. Curiosamente, a redução do HTT estimulou a motilidade anterógrada das vesículas contendo Rab2. A imagem de visão dupla simultânea revelou que HTT e Rab2, 7 ou 19 se movem juntos durante o transporte axonal. Coletivamente, essas descobertas indicam que o HTT provavelmente influencia a motilidade de diferentes vesículas contendo Rab e funções mediadas por Rab. Essas descobertas têm implicações importantes para a compreensão do papel complexo que o HTT desempenha normalmente nos neurônios, que quando interrompido pode levar à morte neuronal e à doença.

Quarta-feira, 28 de outubro

Wang, S. C., Hsu, H. J., Lin, G. W., Wang, T. F., Chang, C. C. e Lin, M. D. (2015). Localização de germe plasmático do HELICc de Vasa em Drosophila: análise de suficiência de domínio e aminoácidos críticos para localização. Sci Rep 5: 14703. PubMed ID: 26419889
Resumo:
A formação do plasma germinativo direciona a especificação da linha germinativa em Drosophila e alguns outros insetos, como pulgões. A identificação da proteína DAAD-box Vasa (Vas) como um marcador de linha germinativa conservado em moscas e pulgões sugere que eles compartilham componentes comuns para a montagem do plasma germinativo. No entanto, até que ponto a ordem de montagem é conservada e a correlação entre funções e sequências de Vas permanece obscura. A expressão ectópica do pulgão Vas (ApVas1) em Drosophila não conduziu a sua localização no plasma germinativo, mas ApVas1 com um domínio C-terminal substituído (HELICc) de Drosophila Vas (DmVas) tornou-se restrito ao plasma germinativo. O próprio HELICc, por meio da interação com Oskar (Osk), foi suficiente para a localização do germe-plasma. Da mesma forma, HELICc do gafanhoto Vas pode ser recrutado para o plasma germinativo em Drosophila. No entanto, a localização de germoplasma não foi observada nos oócitos de Drosophila expressando HELICcs de ortólogos de Vas de pulgões, grilos e camundongos. Glutamina (Gln) 527 em HELICc de DmVas foi identificada como crítica para localização, e seu resíduo correspondente também pode ser detectado no gafanhoto Vas, mas ausente nas outras três espécies. Isso sugere que Gln527 é um alvo direto de Osk ou crítico para a manutenção da conformação HELICc.

Zhou, Z., Yao, X., Li, S., Xiong, Y., Dong, X., Zhao, Y., Jiang, J. e Zhang, Q. (2015). Desubiquitinação de Ci / Gli por Usp7 / HAUSP regula a sinalização de hedgehog. Dev Cell 34: 58-72. ID PubMed: 26120032
Resumo:
A sinalização Hedgehog (Hh) desempenha papéis essenciais no desenvolvimento animal e na homeostase dos tecidos, e sua desregulação causa doenças congênitas e cânceres. A regulação da proteólise de fatores de transcrição Ci / Gli mediada por ubiquitina / proteassoma é central para a sinalização de Hh, mas se a desubiquitinase está envolvida neste processo permanece desconhecido. Este estudo mostra que o Hh estimula a ligação de uma protease específica da ubiquitina Usp7 a Ci, que regula positivamente a atividade de sinalização de Hh por meio da inibição da ubiquitinação e degradação de Ci mediada pelas ligases Slimb-Cul1 e Hib-Cul3 E3. Além disso, o Usp7 forma um complexo com a GMP-sintetase (GMPS) para promover a atividade da via Hh. Finalmente, foi mostrado que a contraparte mamífera do Usp7, HAUSP, regula positivamente a sinalização de Hh modulando a ubiquitinação e estabilidade de Gli. Esses achados revelam um mecanismo conservado pelo qual Ci / Gli é estabilizado por uma enzima de desubiquitinação e identifica o Usp7 / HUASP como um regulador crítico da sinalização de Hh e potencial alvo terapêutico para cânceres relacionados ao Hh.

Terça-feira, 27 de outubro

Du, E. J., Ahn, T. J., Choi, M. S., Kwon, I., Kim, H. W., Kwon, J. Y. e Kang, K. (2015). O repelente de mosquitos citronelal potencializa diretamente Drosophila TRPA1, facilitando a supressão da alimentação. Mol Cells [Epub antes da impressão]. ID PubMed: 26447139
Resumo:
Citronelal, um conhecido repelente de mosquito derivado de planta, foi relatado anteriormente para repelir Drosophila melanogaster através de vias olfativas envolvendo, mas não ativando diretamente, o Potencial de Receptor Transiente Anquirina 1 (TRPA1). Este estudo mostra que o citronelal é um agonista direto para Drosophila e TRPA1s humanos (dTRPA1 e hTRPA1), bem como Anopheles gambiae TRPA1 (agTRPA1). A atividade induzida por citronelais é dependente de isoformas para TRPA1s de Drosophila e Anopheles gambiae. As isoformas dTRPA1 (A) e agTRPA1 (A) recentemente identificadas mostraram correntes provocadas por citronelais com EC50s de 1,0 +/- 0,2 e 0,1 +/- 0,03 mM, respectivamente, em oócitos de Xenopus, enquanto as sensibilidades de TRPA1 (B) s foram muito inferior aos de TRPA1 (A) s. Citronelal aumentou dramaticamente o efeito inibidor de alimentação do agonista TRPA1 N-metilmaleimida (NMM) em Drosophila em uma concentração de NMM que mal repele moscas. Assim, o citronelal pode promover a dissuasão alimentar de moscas-das-frutas por meio de ação direta sobre o dTRPA1 gustativo, revelando a primeira função específica da isoforma para o TRPA1 (A).

Lam, S. S. e Howell, K. S. (2015). Espécies de levedura associadas à drosófila em ecossistemas de vinhedos. FEMS Microbiol Lett 362. PubMed ID: 26391524
Resumo:
A atividade da levedura durante a fermentação do vinho contribui diretamente para a qualidade do vinho, mas a origem e o movimento das leveduras nos vinhedos e ambientes vinícolas não foram resolvidos. Este estudo investigou as espécies de leveduras associadas ao inseto vetor Drosophila para ajudar a entender a dispersão e persistência de leveduras. Drosophila é comumente encontrada em vinhedos e conhecida por ter uma relação mutualística com leveduras em outros ecossistemas. Os drosofilídeos foram coletados de vinhedos, pilhas de resíduos de uva (bagaço) e vinícolas durante a colheita da uva. As moscas capturadas foram identificadas morfologicamente e suas leveduras associadas foram identificadas. Drosophila melanogaster / D. simulans, D. hydei e Scaptodrosophila lativittata foram identificados em 296 moscas Drosophila capturadas. Essas moscas foram associadas com Metschnikowia pulcherrima, Hanseniaspora uvarum, Torulaspora delbrueckii e H. valbyensis leveduras. A diversidade de leveduras e espécies de Drosophila diferiu entre os locais de coleta (vinhedo e bagaço: R = 0,588 para Drosophila e R = 0,644 para leveduras). Surpreendentemente, a principal levedura de fermentação do vinho, Saccharomyces cerevisiae, não foi isolado. As moscas Drosophila estão preferencialmente associadas a diferentes espécies de leveduras nos ambientes de vinhedos e vinícolas, e esta associação pode ajudar na movimentação e dispersão de espécies de leveduras no ecossistema de vinhas e vinícolas.

Segunda-feira, 26 de outubro

Brigui, A., Hofmann, L., Arguelles, C., Sanial, M., Holmgren, R. A. e Plessis, A. (2015). Controle da dinâmica e homeostase do receptor Drosophila Hedgehog Patcheado por duas Ubiquitina ligases C2-WW-HECT-E3. Open Biol 5. PubMed ID: 26446620
Resumo:
Os sinais Hedgehog (HH) conservados controlam o desenvolvimento animal, a manutenção das células-tronco adultas e a oncogênese. Em Drosophila, o co-receptor HH Patched (PTC) controla a formação de gradiente de HH e a sinalização. PTC é regulado para baixo pós-tradução por HH, o que promove a sua endocitose e desestabilização, mas os mecanismos de tráfico de PTC e a sua importância no controlo do PTC ainda não foram compreendidos. O PTC interage com a Ubiquitina E3 (UB) -ligases da família C2-WW-HECT, duas delas - SMURF e NEDD4 - são conhecidas por regular seus níveis. A mutação do motivo PTC PY, que medeia a ligação de membros da família C2-WW-HECT, inibe sua internalização, mas não suas atividades de sinalização autônomas e não autônomas. Além disso, as duas ligases UB-C2-WW-HECT relacionadas NEDD4 e SU (DX) regulam o tráfego de PTC e ajustam finamente sua acumulação por meio de funções parcialmente redundantes, mas distintas. Enquanto NEDD4 e SU (DX) promovem endocitose PTC, apenas SU (DX) é capaz de induzir seu direcionamento lisossomal e degradação. Em conclusão, o tráfego de PTC e a homeostase são rigidamente regulados por uma família de UB-ligases.

Kumar, S. R., Patel, H. e Tomlinson, A. (2015). Apoptose mediada sem asas: como as células cone direcionam a morte de omatídios periféricos no olho de Drosophila em desenvolvimento. Dev Biol [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26428511
Resumo:
Os gradientes de morfogênio desempenham papéis penetrantes no desenvolvimento, e entender como eles são estabelecidos e decodificados é um dos principais objetivos da biologia do desenvolvimento contemporânea. Este estudo examinou como um gradiente de morfogênio sem asas (Wg) padroniza a especialização periférica do olho da mosca.A especialização mais externa é a borda do pigmento, uma faixa espessa de células de pigmento que circunscreve o olho e isola opticamente as laterais da retina. Resulta da coalescência de células de pigmento que sobrevivem à morte da fileira mais externa de omatídios em desenvolvimento. Este estudo investigou aqui como os genes-alvo de Wg expressos nos omatídios moribundos direcionam a sinalização intercelular, os movimentos morfogenéticos e, em última instância, a morte omatidial. Uma característica saliente desse processo é a expressão secundária do morfogênio Wg eliciado nos omatídios pelo sinal Wg primário. Nem as fontes primárias nem secundárias de Wg sozinhas são capazes de promover a morte ommatidial, mas juntas são suficientes para conduzir a apoptose. Isso representa um processo incomum de leitura de gradiente no qual um morfogênio induz sua própria expressão em suas células-alvo para gerar um pico de concentração necessário para empurrar as respostas celulares locais para o próximo limiar de resposta.

Domingo, 25 de outubro

Huu, N.T., Yoshida, H. e Yamaguchi, M. (2015). Gene supressor de tumor OSCP1 / NOR1 regula a apoptose, proliferação, diferenciação e geração de ROS durante o desenvolvimento do olho de Drosophila melanogaster. FEBS J [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26411401
Resumo:
OSCP1 / NOR1 (parceiro transportador de soluto orgânico 1 / proteína 1 contendo domínio nitro oxidado) é uma proteína supressora de tumor conhecida. Foi relatado que OSCP1 medeia o transporte de vários solutos orgânicos para as células, no entanto, seu papel durante o desenvolvimento ainda não foi abordado. Este estudo relata os resultados dos estudos com dOSCP1 (o Drosófila ortólogo de hOSCP1) knockdown voa para elucidar o papel de OSCP1 / NOR1 durante o desenvolvimento. O knockdown de dOSCP1 nos discos imaginais do olho induz um fenótipo de olho áspero em moscas adultas. Este fenótipo resulta de uma indução de apoptose dependente de caspase seguida por uma proliferação compensatória e geração de ROS em discos imaginais oculares. A indução da apoptose parece estar associada à regulação negativa do antiapoptótico Buffy gene e regulação positiva do pró-apoptótico Debcl gene. Esses efeitos de knockdown de dOSCP1 levam à fragmentação mitocondrial, degradação e uma queda na produção de ATP. Também foi descoberto que o knockdown de dOSCP1 causa um defeito na célula do cone e diferenciação das células pigmentares da retina pupal. Além disso, as mutações em genes relacionados à via EGFR, como Spitz e Drk aumentar o fenótipo de olho áspero induzido por dOSCP1-knockdown. Esses resultados sugerem que a dOSCP1 regula positivamente a via de sinalização do EGFR. No geral, essas descobertas indicam que dOSCP1 desempenha vários papéis durante o desenvolvimento do olho de Drosófila

Sobala, L. F., Wang, Y. e Adler, P. N. (2015). ChtVis-Tomato, um repórter genético para a visualização in vivo da deposição de quitina em Drosophila. Desenvolvimento [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26395478
Resumo:
A quitina é um polímero de N-acetilglucosamina abundante e amplamente encontrado no mundo biológico. É um importante constituinte do exoesqueleto cuticular que desempenha um papel fundamental no estilo de vida dos insetos. Uma limitação no estudo da deposição de quitina durante a formação da cutícula tem sido a falta de uma maneira de detectá-la em organismos vivos. Para contornar isso, ChtVis-Tomato, um repórter in vivo para a quitina, foi desenvolvido em Drosophila. O ChtVis-Tomato codifica uma proteína de fusão que contém um sinal de secreção apical, um domínio de ligação de quitina, uma proteína fluorescente e um local de clivagem para liberá-la da membrana plasmática. O repórter de quitina facilita o estudo da deposição de quitina em experimentos de lapso de tempo e, usando-o, depósitos inesperados de fibras de quitina foram identificados em pupas de Drosophila. Cht-Vis-Tomato deve facilitar estudos futuros sobre quitina em Drosophila e outros insetos.

Sábado, 24 de outubro

Hasanagic, M., van Meel, E., Luan, S., Aurora, R., Kornfeld, S. e Eissenberg, J. C. (2015). A proteína receptora da enzima lisossomal (LERP) não é essencial, mas está implicada na função lisossomal em Drosophila melanogaster. Biol Open. ID PubMed: 26405051
Resumo:
A proteína do receptor da enzima lisossomal (LERP) de Drosophila é o ortólogo do receptor de manose 6-fosfato (Man 6-P) independente de cátions de mamíferos, que medeia o tráfego de hidrolases ácidas lisossomais recentemente sintetizadas para lisossomas. No entanto, faltam às moscas as enzimas necessárias para fazer a marca Man 6-P, e os aminoácidos implicados na ligação de Man 6-P pelo receptor de mamífero não são conservados em LERP. Assim, a função de LERP na classificação de enzimas lisossomais para lisossomas em Drosophila não é clara. Este estudo analisou a consequência da depleção de LERP em células S2 e moscas intactas. O knockdown de LERP mediado por RNAi em células S2 teve pouco ou nenhum efeito no conteúdo celular ou na secreção de várias hidrolases lisossomais. Um romance Lerp mutação nula, LerpF6, foi gerado que abole a expressão da proteína LERP. Lerp os mutantes têm viabilidade e fertilidade normais e não apresentam fenótipos evidentes além do peso corporal reduzido. Lerp as moscas mutantes exibem uma diminuição de 30-40% no nível de várias hidrolases lisossomais e são hipersensíveis à cloroquina dietética e à fome, consistente com função do lisossoma prejudicada. A perda de LERP também aumenta o fenótipo do olho associado à autofagia defeituosa. Essas descobertas implicam Lerp na função do lisossoma e autofagia.

Majdi, S., Berglund, E. C., Dunevall, J., Oleinick, A. I., Amatore, C., Krantz, D. E. e Ewing, A. G. (2015). Medições eletroquímicas de liberação de amina quântica estimulada optogeneticamente de varicosidades de células nervosas únicas em larvas de Drosophila. Angew Chem Int Ed Engl [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26387683
Resumo:
Os terminais nervosos encontrados na parede corporal das larvas de Drosophila são facilmente acessíveis para manipulação experimental. Este estudo usou o canal iônico ativado por luz, channelrodopsina-2, que é expresso por manipulação genética em varicosidades Tipo II para estudar a liberação de octopamina em Drosophila. Um método foi desenvolvido para medir a liberação de neurotransmissores de eventos de exocitose em varicosidades individuais no sistema larval de Drosophila por amperometria. Um microeletrodo foi colocado em uma região do músculo contendo uma varicosidade e mantido em um potencial suficiente para oxidar a octopamina e o terminal estimulado pela luz azul. A estimulação óptica dos botões do Tipo II evoca a exocitose da octopamina, que é detectada por meio da oxidação na superfície do eletrodo. 22700 +/- 4200 moléculas de octopamina foram liberadas por vesícula. Este sistema fornece uma plataforma geneticamente acessível para estudar a regulação da liberação de amina em uma sinapse intacta.

Sexta-feira, 23 de outubro

Bader, C. A., Shandala, T., Ng, Y. S., Johnson, I. R. e Brooks, D. A. (2015). Atg9 é necessário para vesículas intraluminais em anfissomos e autolisossomos. Biol Open [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26353861
Resumo:
A autofagia é um processo de reciclagem e degradação intracelular, importante para o metabolismo energético, o metabolismo lipídico, a resposta fisiológica ao estresse e o desenvolvimento do organismo. Durante o desenvolvimento da Drosophila, a autofagia é regulada positivamente nas células do corpo adiposo e do intestino médio, para controlar a função metabólica e permitir a remodelação do tecido. Atg9 é a única proteína transmembrana envolvida na maquinaria autofágica central e acredita-se que tenha um papel na formação do autofagossomo. Durante o desenvolvimento de Drosophila, Atg9 co-localizado com autofagossomos Atg8, endossomos Rab11 e endossomos-lisossomos Lamp1. O silenciamento de RNAi de Atg9 reduziu tanto o número quanto o tamanho dos autofagossomos durante o desenvolvimento e causou mudanças morfológicas nos anfissomos / autolisossomos. Em células de controle houve acidificação compartimentada correspondendo a vesículas Rab11 / Lamp-1 intraluminais, mas em células depletadas Atg9 não havia vesículas intraluminais e a acidificação não foi compartimentada. Conclui-se que o Atg9 é necessário para a formação de vesículas intraluminais e para a acidificação localizada dentro dos anfissomos / autolisossomos e, conseqüentemente, quando depletado, reduz a capacidade de degradar e remodelar o tecido intestinal durante o desenvolvimento.

Meehan, T. L., Kleinsorge, S. E., Timmons, A. K., Taylor, J. D. e McCall, K. (2015). A polarização da camada epitelial e a localização apical das integrinas são necessárias para o engolfamento das células apoptóticas. Dis Model Mech [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26398951
Resumo:
A eliminação ineficiente de células mortas ou detritos pelas células epiteliais pode levar a ou exacerbar condições debilitantes, como retinite pigmentosa, degeneração macular, doença pulmonar obstrutiva crônica e asma. Apesar da importância do envolvimento por células epiteliais, pouco se sabe sobre as mudanças moleculares que são necessárias dentro dessas células. A má regulação das integrinas foi anteriormente associada a estados de doença, sugerindo que uma melhor compreensão da regulação do tráfego de receptores pode ser a chave para o tratamento de doenças causadas por defeitos na fagocitose. Este estudo demonstra que o heterodímero de integrina & alphaPS3 / & betaPS torna-se apicalmente enriquecido e é necessário para o engulfment pelas células do folículo epitelial do ovário de Drosophila. A localização e função do heterodímero da integrina são amplamente direcionadas pela subunidade alfa. Além disso, a polaridade celular adequada promove o enriquecimento assimétrico da integrina, sugerindo que o tráfego de & alphaPS3 / & betaPS ocorre de forma polarizada. Vários genes anteriormente conhecidos por seus papéis no tráfego e na migração celular também são necessários para o engulfment. Além disso, como em mamíferos, a mesma subunidade de integrina alfa é exigida por fagócitos profissionais e não profissionais e células migratórias em Drosophila. Essas descobertas sugerem que as células que migram e envolvem podem usar maquinaria comum e demonstrar um papel crítico para a função da integrina e o tráfego polarizado de subunidades de integrina durante o envolvimento. Este estudo também estabelece as células do folículo epitelial do ovário de Drosophila como um modelo poderoso para a compreensão das mudanças moleculares necessárias para o engolfamento por um epitélio polarizado.

Yang, H., Kronhamn, J., Ekstr & oumlm, J.O., Korkut, G.G. e Hultmark, D. (2015). Sinalização JAK / STAT em Drosófila os músculos controlam a resposta imune celular contra a infecção do parasitóide. EMBO Rep [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26412855
Resumo:
O papel da sinalização JAK / STAT na resposta imune celular de Drosófila não é bem compreendido. Este estudo mostra que a infecção da vespa parasitóide ativa a sinalização JAK / STAT nos músculos somáticos do Drosófila larva, desencadeada pela secreção das citocinas Upd2 e Upd3 dos hemócitos circulantes. Exclusão de upd2 ou upd3, mas não o relacionado os (upd1), reduz a resposta imune celular e a supressão da via JAK / STAT nas células musculares reduz a encapsulação de ovos de vespa e o número de células efetoras de lamelócitos circulantes. Esses resultados sugerem que a sinalização JAK / STAT nos músculos participa de uma defesa imunológica sistêmica contra a infecção por vespas.

Quinta-feira, 22 de outubro

Kramer, M. C., Liang, D., Tatomer, D. C., Gold, B., March, Z. M., Cherry, S. e Wilusz, J. E. (2015). Controle combinatório da expressão de RNA circular de Drosophila por repetições intrônicas, hnRNPs e proteínas SR. Genes Dev [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26450910
Resumo:
Milhares de genes codificadores de proteínas eucarióticas são unidos de forma não canônica para produzir RNAs circulares. A bioinformática indicou que os íntrons longos geralmente flanqueiam os exons que circularam em Drosophila, mas os mecanismos subjacentes pelos quais esses RNAs circulares são gerados são amplamente desconhecidos. Este estudo, usando mutagênese extensa de plasmídeos de expressão e triagem de RNAi, revelou que a circularização da Drosophila laccase2 gene é regulado por repetições intrônicas e fatores de splicing de ação trans. Análogo ao que foi observado em humanos e camundongos, o emparelhamento de bases entre elementos transponíveis altamente complementares facilita o backsplicing. Longas repetições de flanqueamento (aproximadamente 400 nucleotídeos [nt]) promovem a circularização cotranscricionalmente, enquanto os pré-mRNAs contendo repetições mínimas (& lt40 nt) geram RNAs circulares predominantemente após o processamento da extremidade 3 '. Ao contrário do RNA circular Muscleblind (Mbl) anteriormente caracterizado, que requer a proteína Mbl para sua biogênese, foi descoberto que os níveis de RNA circular Laccase2 não são controlados por Mbl ou o produto do gene Laccase2, mas sim por múltiplos hnRNP (ribonucleoproteína nuclear heterogênea) e SR (serina-arginina) proteínas agindo de forma combinatória. As proteínas hnRNP e SR também regulam a expressão de outros RNAs circulares de Drosophila, incluindo Plexina A (PlexA), sugerindo uma estratégia comum para regular backsplicing. Além disso, o laccase2 Os íntrons flanqueadores suportam a circularização eficiente de diversos exons em Drosophila e células humanas, fornecendo uma nova ferramenta para explorar as consequências funcionais da expressão circular de RNA em eucariotos.

Huang, W., Carbone, M.A., Magwire, M.M., Peiffer, J.A., Lyman, R.F., Stone, E.A., Anholt, R.R. e Mackay, T.F. (2015). Base genética da diversidade do transcriptoma em Drosophila melanogaster. Proc Natl Acad Sci U S A [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26483487
Resumo:
Este estudo quantificou a variação de todo o genoma na expressão gênica nas linhas consanguíneas sequenciadas do Drosófila Painel de Referência Genética (DGRP), aumentando o anotado Drosófila transcriptoma em 11%, incluindo milhares de novas regiões transcritas (NTRs). Verificou-se que 42% dos Drosófila O transcriptoma é geneticamente variável em homens e mulheres, incluindo os NTRs, e é organizado em módulos de transcrições geneticamente correlacionadas. Os NTRs freqüentemente estão negativamente correlacionados com a expressão de genes codificadores de proteínas, que foram explorados para anotar funcionalmente os NTRs. Variantes regulatórias para a média e variância da expressão gênica foram identificadas, as quais têm controle genético independente. Os loci de expressão quantitativa de traços (eQTLs) para a média, mas não para a variância, da expressão gênica estão concentrados perto dos genes. Notavelmente, os eQTLs de variância frequentemente interagiram epistaticamente com variantes locais nesses genes para regular a expressão gênica. Esta caracterização abrangente da diversidade de transcriptomas em escala populacional e sua base genética no DGRP é criticamente importante para um sistema de compreensão da variação quantitativa de características.

Quarta-feira, 21 de outubro

Zhou, C., Franconville, R., Vaughan, A. G., Robinett, C. C., Jayaraman, V. e Baker, B. S. (2015). Circuito neural central que medeia a percepção da canção de corte em Drosophila masculina. Elife 4. ID PubMed: 26390382
Resumo:
Os animais usam sinais acústicos em uma variedade de comportamentos sociais, especialmente no namoro. Em Drosophila, a canção é detectada por neurônios mecanossensoriais antenais e posteriormente processada por neurônios aPN1 / aLN (al) de segunda ordem. No entanto, pouco se sabe sobre as vias centrais de mediação das audiências de namoro. Este estudo identificou uma via masculina específica para a audição de corte através dos neurônios protocerebrum protocerebrum ventrolateral de terceira ordem 1 (vPN1) e neurônios pC1 de quarta ordem. A inativação genética de vPN1 ou pC1 interrompe o comportamento de encadeamento masculino induzido por música. As imagens de cálcio revelam que o vPN1 responde preferencialmente à música de pulso com longos intervalos entre pulsos (IPIs), enquanto as respostas de pC1 à música de pulso correspondem às respostas de encadeamento comportamental em IPIs diferentes. Além disso, a ativação genética de vPN1 ou pC1 induziu o encadeamento de corte, imitando a resposta comportamental à música. Estes resultados delineiam a via aPN1-vPN1-pC1 como uma linha marcada para o processamento e transformação da canção de corte em machos.

Bailey, A.P., Koster, G., Guillermier, C., Hirst, E.M., MacRae, J.I., Lechene, C.P., Postle, A.D. e Gould, A.P. (2015). Papel antioxidante para gotículas de lipídios em um nicho de células-tronco de Drosófila. Cell 163: 340-353. ID PubMed: 26451484
Resumo:
As células-tronco residem em microambientes especializados conhecidos como nichos. No decorrer Drosófila desenvolvimento, as células gliais fornecem um nicho que sustenta a proliferação de células-tronco neurais (neuroblastos) durante a fome. Este estudo descobriu que o nicho das células gliais também preserva a proliferação de neuroblastos em condições de hipóxia e estresse oxidativo. Gotículas de lipídios que se formam no nicho da glia durante o estresse oxidativo limitam os níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) e inibem a oxidação de ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs). Essas gotículas protegem a glia e também os neuroblastos das reações em cadeia de peroxidação que podem danificar muitos tipos de macromoléculas. O mecanismo antioxidante subjacente envolve o desvio de PUFAs, incluindo o ácido linoléico derivado da dieta, das membranas para o núcleo das gotículas lipídicas, onde são menos vulneráveis ​​à peroxidação. O estudo revela um papel antioxidante para gotículas de lipídios que podem ser relevantes em muitos contextos biológicos diferentes.

Walker, S.J., Corrales-Carvajal, V.M. e Ribeiro, C. (2015). O circuito de pós-acasalamento modula o processamento do sabor do sal para aumentar a produção reprodutiva em Drosófila. Curr Biol [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26412135
Resumo:
Para otimizar a sobrevivência e a reprodução, os animais devem adequar sua ingestão de nutrientes às suas necessidades atuais. A reprodução altera profundamente as necessidades nutricionais, com muitas espécies mostrando apetite por sódio durante os períodos reprodutivos. Não é compreendido como esse estado interno modifica o processamento de informações neuronais para garantir a homeostase. Este estudo mostra que os níveis de sódio na dieta afetam positivamente a produção reprodutiva em Drosophila melanogaster para satisfazer esse requisito, as fêmeas desenvolvem um apetite forte e específico por sódio após o acasalamento. Foi demonstrado que o acasalamento modula o processamento gustativo para aumentar a probabilidade de iniciar a alimentação com sal. Este efeito pós-acasalamento não é devido à depleção de sal pela produção de ovos, uma vez que a abolição da produção de ovos deixa o apetite por sódio intacto. Em vez disso, o apetite ao sal é induzido de forma independente pela necessidade do Péptido Sexual derivado do sexo masculino que atua no Receptor do Péptido Sexual nos neurônios do trato reprodutivo feminino. Além disso, o apetite pós-acasalamento por sal e fermento é impulsionado pelo silenciamento resultante dos neurônios SAG a jusante. Surpreendentemente, ao contrário do apetite de levedura pós-acasalamento, o apetite de sal não requer octopamina, sugerindo uma divergência no circuito pós-acasalamento. Essas descobertas demonstram que o circuito pós-acasalamento apóia a reprodução, aumentando a palatabilidade de nutrientes específicos. Tal regulação feedforward do processamento sensorial pode representar um mecanismo comum através do qual circuitos reprodutivos sensíveis ao estado modificam comportamentos complexos entre as espécies.

Terça-feira, 20 de outubro

Miles, W.O., Lepesant, J.M., Bourdeaux, J., Texier, M., Kerenyi, M.A., Nakakido, M., Hamamoto, R., Orkin, S.H., Dyson, N.J. e Di Stefano, L. (2015). A família LSD1 de histonas demetilases e o repressor pós-transcricional PUMILIO funcionam em um circuito de feedback regulatório complexo. Mol Cell Biol [Epub ahead of print].ID PubMed: 26438601
Resumo:
A família da desmetilase específica da lisina (K) (LSD1) das histonas desmetilases regula a estrutura da cromatina e o potencial de transcrição dos genes. O LSD1 é freqüentemente desregulado em tumores e a depleção dos membros da família LSD1 causa defeitos de desenvolvimento. Este estudo relata que as reduções na expressão do complexo repressor translacional Pumilio (PUM) aumenta os fenótipos devido à depleção de dLsd1 em Drosófila. O complexo PUM é um alvo da regulação do LSD1 em células de moscas e mamíferos e sua expressão está inversamente correlacionada com os níveis de LSD1 no carcinoma de bexiga humana. Inesperadamente, descobriu-se que PUM regula pós-transcricionalmente os níveis de proteína da família LSD1 em moscas e células humanas, indicando a existência de loops de feedback entre a família LSD1 e o complexo PUM. Esses resultados destacam um novo mecanismo pós-transcricional que regula a atividade de LSD1 e sugere que o ciclo de feedback entre a família LSD1 e o complexo PUM pode ser funcionalmente importante durante o desenvolvimento e em doenças malignas humanas.

Chereji, R.V., et al. (2015). Perfil de todo o genoma da sensibilidade do nucleossomo e acessibilidade à cromatina em Drosophila melanogaster. Nucleic Acids Res [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26429969
Resumo:
Acredita-se que o DNA nucleossômico seja geralmente inacessível aos fatores de ligação ao DNA, como a nuclease microcócica (MNase). Este estudo digeriu Drosófila cromatina com altas e baixas concentrações de MNase para revelar dois tipos distintos de nucleossomos: MNase-sensível e MNase-resistente. Os nucleossomos resistentes a MNase se agrupam em sequências depletadas de A / T e enriquecidas em dinucleotídeos contendo G / C, enquanto os nucleossomos sensíveis a MNase se formam em sequências ricas em A / T encontradas nos locais de início e término da transcrição, potencializadores e locais hipersensíveis à DNase I. As estimativas das energias de formação de nucleossomos indicam que os nucleossomos sensíveis a MNase tendem a ser menos estáveis ​​do que os resistentes a MNase. Surpreendentemente, uma diminuição na temperatura de crescimento celular de cerca de 10 ° C torna os nucleossomos sensíveis à MNase menos acessíveis, sugerindo que as variações observadas na sensibilidade à MNase estão relacionadas às flutuações térmicas das fibras da cromatina ou à atividade do maquinário enzimático. Na vizinhança de genes ativos e locais de hipersensibilidade à DNase I, os nucleossomos são organizados em matrizes periódicas, provavelmente devido à "eliminação" das barreiras potenciais formadas por fatores ligados ao DNA ou por nucleossomos ancorados em suas posições por meio de interações externas. A última ideia é substanciada por um modelo biofísico de posicionamento e energética do nucleossomo, que prevê que os nucleossomos imediatamente a jusante dos locais de início da transcrição são ancorados e recapitula o faseamento do nucleossomo em genes ativos significativamente melhor do que os modelos dependentes de sequência.

Segunda-feira, 19 de outubro

Mirkovic, M., Hutter, L.H., Nov & aacutek, B. e Oliveira, R.A. (2015). A separação prematura da cromátide irmã é mal detectada pelo ponto de verificação do conjunto do fuso como resultado do feedback no nível do sistema. Cell Rep [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26456822
Resumo:
A coesão cromátide irmã, mediada pelo complexo de coesina, é essencial para a mitose fiel. No entanto, a evidência sugere que o mecanismo de vigilância que governa a fidelidade mitótica, o spindle assembly checkpoint (SAC), não é robusto o suficiente para interromper a divisão celular quando a perda de coesão ocorre prematuramente. O mecanismo por trás dessa resposta deficiente não é bem compreendido. Usando o desenvolvimento Drosófila cérebros, este estudo mostra que a separação completa da cromátide irmã provoca uma resposta de ponto de verificação fraca, resultando em saída mitótica anormal após um curto atraso. Abordagens quantitativas de imagem de células vivas combinadas com modelagem matemática indicam que a ativação fraca do SAC após a perda de coesão é causada pela geração de sinal fraco. Isso é ainda mais atenuado por vários loops de feedback na rede de sinalização mitótica. O estudo propõe que múltiplos loops de feedback envolvendo a quinase 1 dependente de ciclina (Cdk1) prejudicam gradualmente a eficiência da correção de erros e aceleram a saída mitótica após a perda prematura de coesão. Essas descobertas explicam como os defeitos de coesão podem escapar da vigilância do SAC.

Christophorou, N., Rubin, T., Bonnet, I., Piolot, T., Arnaud, M. e Huynh, J.R. (2015). Rotações nucleares dirigidas por microtúbulos promovem a dinâmica cromossômica meiótica. Nat Cell Biol [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26458247
Resumo:
No início da meiose, cada cromossomo precisa encontrar seu homólogo e par para garantir a segregação adequada. No Drosófila, o emparelhamento ocorre durante os ciclos mitóticos que precedem a meiose. Este estudo mostra que os núcleos das células germinativas sofrem movimentos marcados durante essa janela de desenvolvimento. Foi demonstrado que os microtúbulos e a Dineína conduzem as rotações nucleares e são necessários para o emparelhamento e agrupamento do centrômero. Foi ainda descoberto que Klaroid (SUN) e Klarsicht (KASH) co-localizam com centrômeros no envelope nuclear e são necessários para movimentos cromossômicos adequados e emparelhamento. Lama (NuMA em vertebrados) foi identificada como co-localizada com centrômeros, Klarsicht e Klaroid. A lama também é necessária para manter a integridade do envelope nuclear e para a montagem correta do complexo sinaptonemal. Esses achados revelam um mecanismo para o emparelhamento de cromossomos em Drosófilae indicam que microtúbulos, centrossomas e proteínas associadas desempenham um papel crucial na organização dinâmica dos cromossomos dentro do núcleo.

Domingo, 18 de outubro

Lin, W.S., et al. (2015). A redução da acidez intestinal induz um fenótipo semelhante ao obeso em Drosophila melanogaster e em ratos. PLoS One 10: e0139722. ID PubMed: 26436771
Resumo:
Com o objetivo de identificar genes envolvidos no estresse e na regulação metabólica, este estudo realizou um Drosófila Triagem de mutagênese mediada por elemento P para resistência à fome. Um mutante, m2, foi isolado que mostrou um aumento de 23% no tempo de sobrevivência em condições de fome. A inserção do elemento P foi mapeada para a região a montante do vha16-1 gene, que codifica a subunidade c da H + -ATPase do tipo vacuolar. Verificou-se que vha16-1 é altamente expresso no intestino da mosca, e que m2 moscas mutantes são hipomórficas para vha16-1 e também exibem acidez do intestino médio reduzida. É provável que esse déficit induza metabolismo alterado e contribua para o envelhecimento acelerado, uma vez que vha16-1 as moscas mutantes têm vida curta e apresentam aumento no peso corporal e no acúmulo de lipídios. Fenótipos semelhantes também foram induzidos por tratamento farmacológico, alimentando moscas normais e camundongos com um inibidor da anidrase carbônica (acetazolamida) ou inibidor da bomba de prótons (PPI, lansoprazol) para suprimir a produção de ácido intestinal. Este estudo pode, portanto, fornecer um modelo útil para investigar a supressão ácida crônica em pacientes.

Yu, Z., Goodman, L. D., Shieh, S. Y., Min, M., Teng, X., Zhu, Y. e Bonini, N. M. (2015). Um modelo de mosca para a expansão de repetição de CCUG da distrofia miotônica tipo 2 revela uma nova interação com MBNL1. Hum Mol Genet 24: 954-962. ID PubMed: 25305073
Resumo:
Repetições de RNA não codificantes expandidas de CUG e CCUG são as causas genéticas subjacentes para distrofia miotônica tipo 1 (DM1) e tipo 2 (DM2), respectivamente. Um ganho de função dessas expansões repetidas patogênicas é mediado, pelo menos em parte, por suas interações anormais com proteínas de ligação a RNA, como MBNL1 (ver Drosophila Muscleblind) e a resultante perda de atividade dessas proteínas. Para estudar os mecanismos patogênicos de expansões de repetição de CCUG em um modelo animal, um modelo de mosca de DM2 foi criado que expressa expansões de repetição de CCUG puras e ininterruptas variando de 16 a 720 repetições de comprimento. Este modelo de mosca para DM2 recapitula características-chave do DM2 humano, incluindo toxicidade induzida por repetição de RNA, formação de focos ribonucleares e mudanças no splicing alternativo. Curiosamente, a expressão de duas isoformas de MBNL1, MBNL135 e MBNL140, leva à clivagem e à regulação positiva simultânea dos níveis dos transcritos de repetição de RNA, com MBNL140 tendo efeitos mais significativos do que MBNL135. Esta propriedade é compartilhada com um modelo de expansão de repetição de CUG fly. Esses resultados sugerem um novo mecanismo de interação entre as expansões de repetição de RNA patogênicas da distrofia miotônica e MBNL1.

Sábado, 17 de outubro

Wang, S., Gao, Y., Song, X., Ma, X., Zhu, X., Mao, Y., Yang, Z., Ni, J., Li, H., Malanowski, KE, Anoja , P., Park, J., Haug, J. e Xie, T. (2015). A regulação redox mediada por sinalização Wnt mantém o nicho de diferenciação de células-tronco da linha germinativa. Elife 4. ID PubMed: 26452202
Resumo:
As células-tronco adultas continuamente se auto-renovam e geram células diferenciadas. No Drosófila ovário, dois nichos separados controlam os processos de auto-renovação e diferenciação de células-tronco da linha germinativa (GSC). Comparado ao nicho de autorrenovação, relativamente pouco se sabe sobre a manutenção e a função do nicho de diferenciação. Este estudo mostra que o estado redox celular regulado pela sinalização Wnt é crítico para a manutenção e função do nicho de diferenciação para promover a diferenciação da progênie GSC. A sinalização Wnt defeituosa causa a perda do nicho de diferenciação e a sinalização BMP regulada positivamente na progênie GSC diferenciada, interrompendo assim a diferenciação das células germinativas. Mecanicamente, a sinalização Wnt controla a expressão de vários genes da família da glutationa-S-transferase e o estado redox celular. Finalmente, Wnt2 e Wnt4 funcionam de forma redundante para manter a sinalização Wnt ativa no nicho de diferenciação. Portanto, este estudo revela uma nova estratégia para a sinalização Wnt na regulação do estado redox celular e na manutenção do nicho de diferenciação.

Felix, M., Chayengia, M., Ghosh, R., Sharma, A. e Prasad, M. (2015). dPak3 regula a polaridade apical-basal em células de fronteira em migração durante a oogênese de Drosophila. Desenvolvimento [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26395489
Resumo:
Durante a migração de células em grupo, as células que se movem coletivamente são fisicamente ligadas umas às outras e retêm algum grau de polaridade apical-basal durante a fase migratória. Embora muito se saiba sobre o sensor de direção, está longe de ser claro como a polaridade é regulada em diversas instâncias de movimento multicelular. Este estudo relata o papel de dPak3, uma proteína quinase serina-treonina ativada por p21 do grupo I, na manutenção da polaridade apical-basal na migração do agrupamento de células fronteiriças durante a oogênese de Drosophila. O dPak3 é enriquecido em células de fronteira e a regulação negativa de sua função impede o movimento das células de fronteira. A imagem de lapso de tempo sugere que o dPak3 afeta o comportamento protrusivo do agrupamento de células da fronteira, regulando especificamente a estabilidade e a direcionalidade das saliências. Este estudo mostra que o dPak3 funciona a jusante da sinalização do receptor de orientação para regular o nível e a distribuição da F-actina nas células da fronteira em migração. É fornecida evidência adicional de que o dPak3 interage geneticamente com o marcador de polaridade lateral Scribble e regula a sinalização da quinase N-terminal c-Jun (JNK) nas células de fronteira em movimento. Uma vez que a depleção de dPak3 resulta na localização incorreta de vários marcadores de polaridade apical-basal, incluindo Stardust, Crumbs e Coracle, e a superexpressão de D-jun resgata a polaridade do cluster depletado de dPak3, é proposto que dPak3 funciona através da sinalização JNK para modular o apical- polaridade basal do aglomerado de células da fronteira em migração. Curiosamente, a perda de polaridade apical-basal também foi observada no agrupamento de células da fronteira esgotado de Rac1, sugerindo que as funções de sinalização do receptor de orientação através de Rac GTPase e dPak3 para regular a polaridade geral do agrupamento para mediar o movimento coletivo eficiente das células da fronteira para o limite do oócito.

Sexta-feira, 16 de outubro

Kuhn, H., Sopko, R., Coughlin, M., Perrimon, N. e Mitchison, T. (2015). A via Atg1-Tor regula o catabolismo da gema em embriões de Drosophila. Desenvolvimento [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26395483
Resumo:
A gema fornece uma importante fonte de nutrientes durante o desenvolvimento inicial dos organismos ovíparos. É composto principalmente de proteínas de vitelogenina acondicionadas em compartimentos ligados à membrana chamados plaquetas de gema. O catabolismo da gema é iniciado pela acidificação das plaquetas da gema, levando à ativação de proteinases semelhantes à catepsina, mas não se sabe como esse processo é desencadeado. O catabolismo da gema inicia na celularização em embriões de Drosophila melanogaster. Usando a tecnologia shRNA materna, o estudo descobriu que o catabolismo da gema depende da via do Tor e da cinase de iniciação da autofagia Atg1. Enquanto Atg1 era necessária para uma explosão de autofagia espacialmente regulada durante a celularização tardia, a autofagia não era necessária para iniciar o catabolismo da gema. É proposto que a via conservada de detecção metabólica do Tor regula o catabolismo da gema, semelhante à regulação metabólica dependente do Tor no lisossoma.

Yadav, R., Kundu, S. e Sarkar, S. (2015). Drosófila glob1 expressa-se dinamicamente e é necessário para o desenvolvimento e a resposta ao estresse oxidativo. Genesis [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26426154
Resumo:
A família da proteína globina é a conservação por meio de arqueas para humanos. Globina (s) tem sido "classicamente" estudada como proteína (s) de ligação ao oxigênio. Drosófila possui três globina genes (glob1, glob2, glob3) localizados em diferentes posições citogenéticas. Este estudo investigou a expressão e função de glob1. Glob1 é codificado maternalmente. A transcrição zigótica ocorre em músculos somáticos, primórdios intestinais, corpos gordurosos, células traqueais, etc. Da mesma forma, a expressão dinâmica de glob1 foi evidente na maioria dos tecidos larvais, curiosamente com alta expressão em células em divisão. Expressão reduzida de glob1 leva a vários prejuízos e letalidade durante a embriogênese e o desenvolvimento larval. Um aumento substancial em ROS celulares ocorre após a expressão reduzida de glob1 levando a deficiência locomotora e envelhecimento precoce em moscas adultas sobreviventes. Assim, além do gerenciamento de oxigênio, globina gene (s) também estão envolvidos na regulação de vários aspectos do desenvolvimento em Drosófila.

Quinta-feira, 15 de outubro

Ni, L., Zheng, Y., Hara, M., Pan, D. e Luo, X. (2015). Base estrutural para ativação dependente de Mob1 da cascata de quinase Mst-Lats central na sinalização de Hipopótamo. Genes Dev 29: 1416-1431. ID PubMed: 26108669
Resumo:
A cascata de quinase Mst-Lats é central para a via supressora de tumor Hippo que controla o tamanho do órgão e a homeostase do tecido. A proteína adaptadora Mob1 promove a ativação de Lats por Mst, mas o mecanismo permanece desconhecido. Este estudo mostra que o Mob1 humano se liga a motivos de docking autofosforilados em Mst2 ativo. Esta ligação permite a fosforilação de Mob1 por Mst2. Mob1 fosforilado sofre ativação conformacional e se liga a Lats1. Determinamos as estruturas cristalinas dos complexos fosfo-Mst2-Mob1 e fosfo-Mob1-Lats1, revelando a base estrutural de ambos os eventos de ligação dependentes de fosforilação. Outras análises bioquímicas e funcionais demonstram que Mob1 medeia a ativação de Lats1 por meio de andaimes dinâmicos e mecanismos alostéricos. Assim, Mob1 atua como um acoplador regulado por fosforilação da ativação da quinase em virtude de sua capacidade de envolver vários ligantes. É proposto que as interações de docking de elementos não quinase, em etapas, disparadas por fosforilação, aumentam a especificidade e a robustez das cascatas de sinalização da quinase.

Balmer, S., Dussert, A., Collu, G. M., Benitez, E., Iomini, C. e Mlodzik, M. (2015). Componentes do complexo A de transporte intraflagelar funcionam independentemente do cílio para regular a sinalização Wnt canônica em Drosophila. Dev Cell 34: 705-718. ID PubMed: 26364750
Resumo:
O desenvolvimento de organismos multicelulares requer a regulação precisamente coordenada de um grupo evolutivamente conservado de vias de sinalização. O controle temporal e espacial dessas cascatas de sinalização é obtido por meio de redes de proteínas regulatórias, segregação de componentes da via em compartimentos subcelulares específicos ou ambos. Em vertebrados, a desregulação da função ciliar primária tem sido fortemente associada a defeitos de sinalização do desenvolvimento, mas ainda não está claro se os componentes da via do sequestrador dos cílios para regular sua ativação ou as proteínas associadas aos cílios modulam diretamente os eventos de sinalização do desenvolvimento. Para elucidar esta questão, uma triagem baseada em RNAi foi conduzida em células não ciliadas de Drosophila para testar os fenótipos de perda de função independente do cílio das proteínas ciliares nas vias de sinalização do desenvolvimento. Os resultados não mostram nenhum efeito na sinalização de Hedgehog. Em contraste, a triagem identificou várias proteínas associadas aos cílios como funcionando na sinalização Wnt canônica. A caracterização adicional de componentes específicos do complexo A de Transporte Intraflagelar revelou uma função independente dos cílios na potencialização dos sinais Wnt ao promover a atividade da beta-catenina / Armadillo.

Quarta-feira, 14 de outubro

O desenvolvimento de tecnologias de sequenciamento e computação de suporte permitem a descoberta de pequenas moléculas de RNA que anteriormente escapavam à detecção ou foram ignoradas devido ao baixo número de contagem. Este estudo descreve tRFs de Drosophila melanogaster, que parecem ter uma série de características estruturais e funcionais semelhantes às dos miRNAs, mas são menos abundantes. Como é o caso com miRNAs, (1) tRFs parecem ter isoformas distintas, preferencialmente originadas da extremidade 5 'ou 3' de uma molécula precursora (neste caso, tRNA), (2) as extremidades de tRFs parecem conter "semente" curta sequências que combinam com regiões conservadas em 12 genomas de Drosophila, preferencialmente em 3 'UTRs, mas também em íntrons e exons (3) tRFs exibem carga de isoforma específica em Ago1 Ago2 e, portanto, provavelmente funcionam em complexos RISC (4) níveis de carga em Ago1 e Ago2 diferem consideravelmente e (5) a expressão e a carga de tRF parecem ser dependentes da idade, indicando mudanças regulatórias potenciais de organismos jovens para adultos. Leituras de tRF de Drosophila mapeadas para genes de tRNA nuclear e mitocondrial para todos os 20 aminoácidos, enquanto estudos anteriores geralmente relataram fragmentos de apenas alguns tRNAs. Esses tRFs mostram uma série de semelhanças com miRNAs, incluindo sequências de sementes. Com base na complementaridade com regiões conservadas de Drosophila, tais sequências de sementes e seus possíveis alvos foram identificados com correspondências nas regiões 3'UTR. Surpreendentemente, os genes-alvo potenciais dos tRFs mais abundantes mostram um enriquecimento significativo da Ontologia Genética no desenvolvimento e na função neuronal. Este último sugere que o envolvimento de tRFs na via de interferência do RNA pode desempenhar um papel na atividade cerebral ou nas alterações cerebrais com a idade.

Coyne, AN, Yamada, SB, Siddegowda, BB, Estes, PS, Zaepfel, BL, Johannesmeyer, JS, Lockwood, DB, Pham, LT, Hart, MP, Cassel, JA, Freibaum, B., Boehringer, AV, Taylor , JP, Reitz, AB, Gitler, AD e Zarnescu, DC (2015). A proteína X frágil atenua a toxicidade do TDP-43, remodelando os grânulos de RNA e restaurando a tradução. Hum Mol Genet. ID PubMed: 26385636
Resumo:
A desregulação do RNA é um mecanismo de doença recentemente reconhecido na esclerose lateral amiotrófica (ELA).Este estudo identificou a proteína de retardo mental Drosophila frágil X (dFMRP) como um modificador genético robusto da toxicidade dependente de TDP-43 em um modelo de Drosophila de ELA. A superexpressão de dFMRP (dFMRP OE) atenua os defeitos locomotores dependentes de TDP-43 e reduz o tempo de vida em Drosophila. O TDP-43 e o FMRP formam um complexo em moscas e células humanas. Em neurônios motores, a expressão de TDP-43 aumenta a associação de dFMRP com grânulos de estresse e colocaliza com a proteína de ligação poliA de uma maneira dependente de variante. Além disso, a dosagem de dFMRP modula a solubilidade e a mobilidade molecular de TDP-43 com superexpressão de dFMRP, resultando em uma redução significativa de TDP-43 na fração agregada. Os experimentos de fracionamento de polissomo indicam que dFMRP OE também alivia a inibição da tradução do mRNA de futsch, um mRNA alvo de TDP-43, que regula a arquitetura da sinapse neuromuscular. Restauração de futsch tradução por dFMRP OE mitiga fenótipos morfológicos dependentes de Futsch na junção neuromuscular, incluindo tamanho sináptico e presença de botões satélite. Esses dados sugerem um modelo em que dFMRP é neuroprotetor, remodelando grânulos de RNA contendo TDP-43, reduzindo a agregação e restaurando a tradução de mRNAs específicos em neurônios motores.

Weng, R. e Cohen, S. M. (2015). Controle da proliferação de neuroblastos cerebrais centrais de Drosophila tipo I e II por bantam microRNA. Desenvolvimento [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26395494
Resumo:
A regulação pós-transcricional da autorrenovação das células-tronco por microRNAs está emergindo como um importante mecanismo de controle da homeostase do tecido. Este relatório fornece evidências de que o bantam O microRNA controla o número de neuroblastos e a proliferação no cérebro central da Drosophila. bantam também suporta a proliferação das células progenitoras neurais intermediárias de amplificação de trânsito em linhagens de neuroblastos do tipo II. Os fatores de células-tronco pirralho, prospero são identificados como bantam alvos atuando em diferentes aspectos desses processos. Assim bantam parece atuar em várias etapas regulatórias na manutenção e proliferação de neuroblastos e sua progênie para regular o crescimento do cérebro central.

Terça-feira, 13 de outubro

Alex, A., et al. (2015). Um gene de relógio circadiano, chorar, afeta a morfogênese e a função do coração em Drosophila, conforme revelado por microscopia de coerência óptica. PLoS One 10: e0137236. ID PubMed: 26348211
Resumo:
Os ritmos circadianos são oscilações endógenas e estimuláveis ​​de processos físicos, mentais e comportamentais em resposta a estímulos ambientais locais. O papel que os genes do relógio circadiano desempenham no desenvolvimento e função do coração são mal compreendidos. O criptocromo Drosophila (dCry) é um gene do relógio circadiano que codifica um componente principal do ciclo de feedback negativo do relógio circadiano. Em comparação com o estágio embrionário, os níveis de expressão relativa de dCry mostraram um aumento significativo (& gt100 vezes) em Drosophila durante os estágios de pupa e adulto. Este estudo realizou análises de alterações funcionais e morfológicas no coração de Drosophila ao longo de seu ciclo de vida pós-embrionário. O coração de Drosophila exibiu importantes alterações morfológicas e funcionais durante seu desenvolvimento. Notavelmente, a frequência cardíaca (FC) e o período de atividade cardíaca (PAC) de Drosophila apresentaram variações significativas durante a fase de pupa, quando ocorreu a remodelação cardíaca. A partir das imagens OCM do modo M (2D + tempo), os parâmetros cardíacos estruturais e funcionais de Drosophila em diferentes estágios de desenvolvimento foram determinados quantitativamente. Para estudar o papel funcional do dCry no desenvolvimento do coração da Drosophila, o dCry foi silenciado por RNAi no coração e na mesoderme da Drosophila, e mediu quantitativamente a morfologia e a função do coração nessas moscas ao longo de seu desenvolvimento. O silenciamento de dCry resultou em FC mais lenta, CAP reduzido, menor tamanho da câmara cardíaca, letalidade pupal e segmentação posterior interrompida que estava relacionada ao aumento da expressão de uma proteína do compartimento posterior, Wingless. Coletivamente, esses estudos forneceram novas evidências de que o gene do relógio circadiano, dCry, desempenha um papel essencial na morfogênese e função do coração.

Wicker-Thomas, C., et al. (2015). Origem flexível de precursores de hidrocarbonetos / feromônios em Drosophila melanogaster.J Lipid Res [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26353752
Resumo:
Em insetos terrestres, os hidrocarbonetos cuticulares (CHCs) fornecem proteção contra a dessecação. CHCs específicos também podem atuar como feromônios, que são importantes para o acasalamento bem-sucedido. Os enócitos são células abdominais que atuam como unidades especializadas para a biogênese de CHC que consiste na síntese de ácidos graxos de cadeia longa (LCFA), dessaturação opcional (s), alongamento para ácidos graxos de cadeia muito longa (VLCFAs) e remoção do carboxil grupo. Ao investigar a biogênese de CHC em Drosophila melanogaster, este estudo mostrou que a síntese de VLCFA ocorre apenas dentro dos oenócitos. Por outro lado, várias vias, que podem compensar umas às outras, podem alimentar o pool de oenócitos de LCFAs, sugerindo que esta etapa é um nó crítico para regular a síntese de CHC. É importante ressaltar que as moscas deficientes na síntese de LCFA sacrificavam seus estoques de triacilglicerol enquanto mantinham alguma produção de CHC. Além disso, a produção de feromônios foi menor em moscas adultas que emergiram de larvas que foram alimentadas com excesso de lipídios na dieta e seu sucesso de acasalamento foi menor. Além disso, foi demonstrado que a produção de feromônios nos oenócitos depende do metabolismo lipídico no tecido adiposo e que FATP, uma acil-CoA-sintase bipartida (ACS) / transportador de ácido graxo, provavelmente atua através de seu domínio ACS na via de oenócitos de Biogênese de CHC. Este estudo destaca a importância das contribuições ambientais e fisiológicas na regulação da síntese de LCFA para, eventualmente, controlar a comunicação sexual em um animal polífago.

Segunda-feira, 12 de outubro

Cavanaugh, D. J., Vigderman, A. S., Dean, T., Garbe, D. S. e Sehgal, A. (2015). O relógio circadiano bloqueia o sono por meio da modulação dependente do horário dos neurônios promotores do sono. Sleep [Epub antes da impressão]. ID PubMed: 26350473
Resumo:
O sono está sob o controle de processos homeostáticos e circadianos, que interagem para determinar o tempo e a duração do sono, mas os mecanismos pelos quais o sistema circadiano modula o sono são amplamente desconhecidos. Este estudo usou a ativação e inibição neuronal específica para adultos e controlada temporalmente para identificar uma interação entre o relógio circadiano e uma nova população de neurônios promotores do sono em Drosophila. Neste estudo, as moscas transgênicas expressaram dTRPA1, um ativador neuronal, ou Shibire ts1, um inibidor da liberação sináptica, em pequenos subconjuntos de neurônios. O sono, conforme determinado pelo monitoramento da atividade e rastreamento de vídeo, foi avaliado antes e depois da ativação ou inibição induzida pela temperatura usando essas moléculas efetoras. Este estudo comparou o efeito dessas manipulações em moscas controle e em moscas mutantes que não tinham componentes do relógio circadiano molecular. A ativação ou inibição específica para adultos de uma população de neurônios que se projeta para o corpo em forma de leque dorsal, promotor do sono, resultou em controle bidirecional sobre o sono. Curiosamente, a magnitude das mudanças do sono dependia da hora do dia. A ativação dos neurônios promotores do sono foi eficaz ao máximo durante o meio do dia e da noite, e foi relativamente ineficaz durante as transições do dia para a noite e da noite para o dia. Esses efeitos específicos de hora do dia estavam ausentes em moscas que não tinham relógios circadianos funcionais. Em conclusão, o sistema circadiano funciona para bloquear o sono por meio da inibição ativa em horários específicos do dia. Esses dados identificam um mecanismo pelo qual o sistema circadiano evita o início prematuro do sono no final da noite, quando o impulso homeostático do sono está alto.

Stern, U., He, R. e Yang, C. H. (2015). Análise do comportamento animal por meio da classificação de cada quadro de vídeo usando redes neurais convolucionais. Sci Rep 5: 14351. PubMed ID: 26394695
Resumo:
A análise de alto rendimento do comportamento animal requer software para analisar vídeos. Esse software analisa cada quadro individualmente, detectando partes do corpo dos animais. Mas a análise da imagem raramente tenta reconhecer "estados comportamentais" - por exemplo, ações ou expressões faciais - diretamente da imagem em vez de usar as partes do corpo detectadas. Este estudo mostra que as redes neurais convolucionais (CNNs) - uma abordagem de aprendizado de máquina que recentemente se tornou a principal técnica para reconhecimento de objetos, estimativa de pose humana e reconhecimento de ação humana - foram capazes de reconhecer diretamente a partir de imagens se a Drosophila estava "ligada" (em pé ou andando) ou "desligado" (sem contato físico com) substratos de postura de ovos para cada quadro dos vídeos. Várias redes e transformações de imagem foram para otimizar a precisão da tarefa de classificação, alcançando uma taxa de erro surpreendentemente baixa de apenas 0,072%. A classificação de um dos vídeos de 8 horas levou menos de 3 horas usando uma GPU rápida. A abordagem permitiu descobrir uma nova modificação de comportamento induzida pela postura de ovos em Drosophila. Além disso, deve ser prontamente aplicável a outras tarefas de análise do comportamento.

Domingo, 11 de outubro

Kao, J. Y., Lymer, S., Hwang, S. H., Sung, A. e Nuzhdin, S. V. (2015). Barreiras reprodutivas pós-acasalamento contribuem para o isolamento sexual incipiente dos Estados Unidos e Caribe Drosophila melanogaster. Ecol Evol 5: 3171-3182. ID PubMed: 26357543
Resumo:
Os estágios iniciais de especiação começam com o surgimento do isolamento sexual. Compreender a influência das barreiras reprodutivas neste processo evolutivo é um esforço contínuo. Este artigo apresenta um estudo de populações mistas de Drosophila melanogaster do sudeste dos Estados Unidos e das ilhas do Caribe conhecidas por serem uma zona de contato secundária de populações de origem européia e africana em isolamento sexual incipiente. A existência de barreiras reprodutivas premating foi previamente estabelecida, mas esses tipos de barreiras não são a única fonte que molda o isolamento sexual. Para avaliar a influência das barreiras pós-acasalamento, este estudo investigou as barreiras pós-acasalamento putativas do comportamento de postura e postura das fêmeas, bem como a eclodibilidade dos ovos postos e a longevidade das fêmeas após o acasalamento. Na região central da suposta zona híbrida das populações americanas e caribenhas, menor eclodibilidade dos ovos postos foi observada, acompanhada por maior resistência a danos após o acasalamento com machos menos aparentados. Esses resultados ilustram que as barreiras reprodutivas pós-acasalamento agem ao lado das barreiras pré-acasalamento e da mistura genética, como incompatibilidades de híbridos, e influenciam as fases iniciais do isolamento sexual.

Huang, Y., Stinchcombe, J. R. e Agrawal, A. F. (2015). Variância genética quantitativa em populações de moscas experimentais evoluindo com ou sem heterogeneidade ambiental. Evolution 69 (10): 2735-46. ID PubMed: 26362112
Resumo:
Normalmente, espera-se que ambientes heterogêneos mantenham mais variação genética na aptidão dentro das populações do que ambientes homogêneos. No entanto, a precisão dessa afirmação depende da forma de heterogeneidade, bem como da base genética das características de aptidão e de quão semelhante o ambiente do ensaio é ao ambiente da seleção anterior. Este estudo mediu a variância genética quantitativa (QG) para três características importantes para adequação usando populações experimentais replicadas de Drosophila melanogaster evoluindo sob quatro regimes seletivos: meio enriquecido com sal constante (Sal), meio enriquecido com cádmio constante (Cad) e dois regimes heterogêneos que variam temporalmente (Temp) ou espacialmente (Espacial). Como prevê a teoria, as populações espaciais tendem a abrigar mais variação genética do que as populações Temp ou aquelas mantidas em um ambiente constante igual ao ambiente do ensaio. Ao contrário do que se esperava, as populações de Sal tendem a ter mais variação genética do que as populações de Cad em ambos os ambientes de ensaio. Os padrões para as variações de QG entre os regimes em relação aos dados relatados anteriormente sobre a diversidade de sequência de todo o genoma. Para alguns traços, os padrões QG são semelhantes aos padrões de diversidade de SNPs selecionados ecologicamente, enquanto os padrões QG para alguns outros traços se assemelham aos SNPs neutros.

Sábado, 10 de outubro

Dubos, A., et al. (2015). Depleção condicional de deficiência intelectual e gene candidato ATP6AP2 de Parkinsonismo em mosca e camundongo induz comprometimento cognitivo e neurodegeneração. Hum Mol Genet [Epub à frente da impressão]. ID PubMed: 26376863
Resumo:
O ATP6AP2, um componente acessório essencial da H + ATPase vacuolar (V-ATPase), foi associado à deficiência intelectual (DI) e ao parkinsonismo. O ATP6AP2 tem sido implicado em várias vias de sinalização, entretanto, pouco se sabe sobre seu papel no sistema nervoso. Para decifrar sua função no comportamento e cognição, knockdowns condicionais de ATP6AP2 foram gerados e caracterizados no sistema nervoso de Drosophila e modelos de camundongos. Em Drosophila, o knockdown de ATP6AP2 induziu fototaxia defeituosa e neurônios fotorreceptores vacuolados e células de pigmento quando esgotados nos olhos e memória alterada de curto e longo prazo quando esgotados no corpo do cogumelo. No camundongo, a deleção condicional de Atp6ap2 em neurônios glutamatérgicos causou aumento da atividade locomotora espontânea e alteração da memória do medo. Ambos os camundongos knockdown e deleção de Drosophila ATP6AP2 apresentaram defeitos de transmissão pré-sináptica e com um número e morfologia anormais de sinapses. Além disso, os camundongos de deleção mostraram defeitos de autofagia que levaram à degeneração axonal e neuronal no córtex e no hipocampo. Surpreendentemente, a mielinização dos axônios foi afetada nos camundongos mutantes e alterações no transporte axonal foram observadas em Drosophila. De acordo com os fenótipos identificados entre as espécies, o perfil do transcriptoma de todo o genoma da deleção de hipocampos de camundongos revelou desregulação de genes envolvidos na mielinização, potencial de ação, vesículas ligadas à membrana e comportamento motor. Em resumo, a interrupção do ATP6AP2 em camundongos e mosca leva ao comprometimento cognitivo e à neurodegeneração, imitando aspectos da neuropatologia associada às mutações de ATP6AP2 em humanos. Esses resultados identificam o ATP6AP2 como um gene essencial para o sistema nervoso.

Cutler, T., Sarkar, A., Moran, M., Steffensmeier, A., Puli, O. R., Mancini, G., Tare, M., Gogia, N. e Singh, A. (2015). Modelo de olho de drosófila para estudar o papel neuroprotetor da proteína de ligação CREB (CBP) na doença de Alzheimer. PLoS One 10: e0137691. ID PubMed: 26367392
Resumo:
Este estudo utilizou o sistema Gal4 / UAS para desenvolver um modelo de mosca da fruta transgênica para a neurodegeneração mediada por A e beta42 (ver Drosophila Appl). A expressão incorreta direcionada de A & beta42 humano nos neurônios fotorreceptores em diferenciação do olho em desenvolvimento da mosca transgênica desencadeia a neurodegeneração. Este fenótipo neurodegenerativo progressivo se assemelha à neuropatologia de Alzheimer. Uma histona acetilase, CREB Binding Protein (CBP), foi identificada como um modificador genético da neurodegeneração mediada por A e beta42. A expressão incorreta direcionada de CBP juntamente com A e beta42 na retina em diferenciação pode resgatar significativamente a neurodegeneração. O ganho de função do CBP resgata a neurodegeneração mediada por A e beta42 ao bloquear a morte celular. A expressão incorreta de A e beta42 afeta a segmentação dos axônios da retina para o cérebro, mas a expressão incorreta do CBP de comprimento total junto com A e beta42 pode restaurar esse defeito. A proteína CBP possui múltiplos domínios e é conhecida por interagir com muitas proteínas diferentes. Esta análise da função da estrutura usando construtos truncados sem um ou mais domínios da proteína CBP, em moscas transgênicas revelou que os domínios Bromo, HAT e poliglutamina (BHQ) juntos são necessários para a função neuroprotetora do CBP. Este domínio BHQ de CBP não foi atribuído para promover a sobrevivência em quaisquer outras doenças neurodegenerativas. Este estudo identificou o CBP como um modificador genético da neurodegeneração mediada por A e beta42. Além disso, este estudo identificou que o domínio BHQ do CBP é o responsável por sua função neuroprotetora. Esses estudos podem ter um impacto significativo na compreensão da base genética da DA.

Sexta-feira, 9 de outubro

Housden, BE, Valvezan, AJ, Kelley, C., Sopko, R., Hu, Y., Roesel, C., Lin, S., Buckner, M., Tao, R., Yilmazel, B., Mohr, SE, Manning, BD e Perrimon, N. (2015). Identificação de potenciais alvos de drogas para o complexo de esclerose tuberosa por telas sintéticas combinando nocautes baseados em CRISPR com RNAi. Sci Signal 8: rs9. ID PubMed: 26350902
Resumo:
A família de supressores tumorais do complexo de esclerose tuberosa (TSC), TSC1 e TSC2, funcionam juntos em um complexo de proteínas evolutivamente conservado que é um ponto de convergência para as principais vias de sinalização celular que regulam o complexo mTOR 1 (mTORC1). A mutação ou inibição aberrante do complexo TSC é comum em várias síndromes tumorais e cânceres humanos. A descoberta de novas estratégias terapêuticas para direcionar seletivamente as células com perda funcional deste complexo é, portanto, de relevância clínica para pacientes com CET não maligno e aqueles com cânceres esporádicos. Este estudo desenvolveu um método baseado em CRISPR para gerar linhas celulares de Drosophila mutantes homogêneas. Ao combinar as linhas de células mutantes TSC1 ou TSC2 com rastreios de RNAi contra todas as quinases e fosfatases, foram identificadas interações sintéticas com TSC1 e TSC2. O knockdown individual de três genes candidatos (mRNA-cap, Pitslre e ortólogos CycT de RNGTT, CDK11 e CCNT1 em humanos) reduziu a taxa de crescimento populacional de células de Drosophila sem TSC1 ou TSC2, mas não de células de tipo selvagem. Além disso, o knockdown individual desses três genes teve efeitos inibidores de crescimento semelhantes em linhas de células deficientes em TSC2 de mamíferos, incluindo células derivadas de tumor humano, ilustrando o poder desta estratégia de triagem de espécies cruzadas para identificar potenciais alvos de drogas.

Kopp, Z. A., et al. (2015). A regulação negativa Rpd3 específica do coração melhora a função cardíaca e a longevidade. Envelhecimento (Albany NY) 7: 648-663. ID PubMed: 26399365
Resumo:
A regulação negativa de Rpd3, um homólogo da histona desacetilase 1 de mamíferos (HDAC1), estende a vida útil em Drosophila melanogaster. Uma vez revelado que as moscas-das-frutas de vida longa exibem declínio cardíaco limitado, investigou-se se a regulação negativa do Rpd3 melhoraria a resistência ao estresse e / ou a longevidade quando direcionada ao coração. Contestado contra três estressores diferentes (oxidação, fome e calor), o downregulation Rpd3 específico do coração aumentou significativamente a resistência ao estresse em moscas. No entanto, esses níveis mais elevados de resistência não foram observados quando a regulação negativa de Rpd3 foi direcionada em outros tecidos ou quando outras moscas de longa vida foram testadas de maneira específica para o coração. Curiosamente, as expressões de genes anti-envelhecimento, como Sod2, foxo e Thor, foram aumentadas sistemicamente como consequência da regulação negativa de Rpd3 específica para o coração. Mostrando maior resistência ao estresse oxidativo, a regulação negativa Rpd3 específica do coração exibiu simultaneamente funções cardíacas melhoradas, demonstrando um aumento da freqüência cardíaca, diminuição da insuficiência cardíaca e recuperação cardíaca acelerada.Por outro lado, a regulação positiva de Rpd3 no tecido cardíaco reduziu a resistência sistêmica contra o estresse por calor com a função cardíaca diminuída, também especificando os níveis de Rpd3 fosforilados como um modulador significativo. A regulação negativa contínua de Rpd3 ao longo do envelhecimento aumentou a expectativa de vida, implicando que a Rpd3 desacetilase no coração desempenha um papel significativo na função cardíaca e na longevidade para modular sistemicamente a resposta da mosca ao ambiente.

Quinta-feira, 8 de outubro

Ordan, E. e Volk, T. (2015). Uma função não sinalizadora do Robo2 nos tendões é essencial para o processamento da fenda e padronização muscular. Development 142 (20): 3512-8. ID PubMed: 26400093
Resumo:
A locomoção coordenada de um organismo depende do desenvolvimento de conexões musculoesqueléticas adequadas. Em Drosophila, a via de sinalização Slit-Robo guia os músculos aos tendões. Este estudo mostra que o receptor Slit Roundabout 2 (Robo2) desempenha um papel não autônomo em relação às células, direcionando os músculos para seus tendões correspondentes. O Robo2 é expresso por tendões e sua atividade não sinalizadora nessas células promove a clivagem da Slit, produzindo um sinal de guia do Slit-N-terminal clivado, que fornece sinalização de curto alcance para os músculos. Consistentemente, robo2 embriões mutantes exibiram um fenótipo muscular semelhante ao de fenda, que não poderia ser resgatado por uma expressão de Robo2 específica do músculo, mas sim por um Robo2 ectodermicamente derivado. Alternativamente, este fenótipo muscular pode ser induzido por específicos do tendão robo2RNAi. A imobilização da membrana de Slit, ou sua forma N-terminal clivada nos tendões, contorna o requisito funcional do Robo2 nos tendões, verificando que o principal papel do Robo2 é promover a associação da Slit com a membrana celular do tendão. A fenda clivada (Slit-N) tende a oligomerizar, enquanto a fenda não clivável de comprimento total não. Portanto, é proposto que os oligômeros Slit-N produzidos na membrana do tendão pelo Robo2 sinalizem para o músculo que se aproxima pela atividade combinada do RoboRobo3. Esses achados estabelecem um mecanismo mediado por Robo2, independente da sinalização essencial para limitar a distribuição em Slit, que pode ser relevante para a regulação da sinalização de curto alcance mediada por Slit em sistemas adicionais.

Dong, Q., Brenneman, B., Fields, C. e Srivastava, A. (2015). Uma Catepsina-L é necessária para o comportamento invasivo durante o desenvolvimento do primórdio do saco de ar em Drosophila melanogaster. FEBS Lett 589 (20 Pt B): 3090-7. ID PubMed: 26341534
Resumo:
A Drosophila Air Sac Primordium (ASP) surgiu como uma importante estrutura onde eventos celulares, genéticos e moleculares responsáveis ​​pelo comportamento invasivo e morfogênese ramificada podem ser estudados. Este relatório apresenta dados que demonstram que uma Catepsina-L codificada pelo gene Cysteine ​​proteinase-1 (CP1) em Drosophila é necessária para o comportamento invasivo durante o desenvolvimento de ASP. CP1 é expresso em ASP e o knockdown de CP1 resulta na supressão do comportamento migratório e invasivo observado durante o desenvolvimento de ASP. Foi ainda demonstrado que o CP1 possivelmente regula o comportamento invasivo, promovendo a degradação da membrana basal. Esses dados fornecem pistas sobre o possível papel da Catepsina L no desenvolvimento do pulmão humano e na invasão do tumor, especialmente, dadas as semelhanças entre o pulmão humano e o desenvolvimento de Drosophila ASP.

Quarta-feira, 7 de outubro

Zheng, Y., Wang, W., Liu, B., Deng, H., Uster, E. e Pan, D. (2015). Identificação de Happyhour / MAP4K como quinases semelhantes a Hpo / Mst alternativas na cascata de hipocinase. Dev Cell 34 (6): 642-55. ID PubMed: 26364751
Resumo:
Em Drosophila e mamíferos, a cascata canônica de Hipocinase é mediada por Hpo / Mst agindo através da quinase intermediária Wts / Lats para fosforilar o coativador transcricional Yki / YAP / TAZ. No entanto, os mecanismos subjacentes que ligam a atividade Yki / YAP / TAZ ao citoesqueleto de actina são mal compreendidos. Usando discos imaginais de Drosophila como um modelo in vivo, este estudo mostra que Wts, mas não Hpo, é geneticamente indispensável para a localização subcelular mediada pelo citoesqueleto de Yki. Por meio de uma triagem sistemática, a Ste-20 quinase Happyhour (Hppy) e sua contraparte de mamífero MAP4K1 / 2/3/5 foram identificadas como uma quinase alternativa que fosforila o motivo hidrofóbico de Wts / Lats de maneira semelhante a Hpo / Mst. Consistente com sua função redundante como quinases ativadoras de Wts / Lats, a perda combinada de Hpo / Mst e Hppy / MAP4K abole a regulação mediada pelo citoesqueleto da localização subcelular Yki / YAP, bem como a translocação citoplasmática YAP induzida pela inibição de contato.

Kim, K., Yoon, J., Yim, J. e Kim, H. J. (2015). A deneddilase 1 regula a atividade da deneddilase do sinalossomo Cop9 em Drosophila melanogaster. Insect Sci [Epub ahead of print]. ID PubMed: 26332639
Resumo:
A conjugação NEDD8 de Cullin tem um papel importante na degradação de proteínas mediada por ubiquitina. O sinalossomo COP9, do qual CSN5 é a principal subunidade catalítica, é a principal denedilase de Cullin. Outra deneddylase, Deneddylase 1, também demonstrou processar o precursor Nedd8. Em Drosophila, os mutantes DEN1 não têm níveis aumentados de neddilação de Cullin, mas, em vez disso, mostram uma diminuição significativa de Cullin neddilado. Esta diminuição característica em Cullins neddilados no fundo nulo DEN1 pode ser resgatada pela superexpressão de UAS-dDEN1 WT, mas não por superexpressão de NEDD8 maduro, indicando que este fenótipo é distinto da função de processamento de NEDD8 de DEN1. Este estudo examinou o papel da interação DEN1-CSN na regulação da neddilação de Cullin. A superexpressão de DEN1 em um fundo de hipo de CSN5 reduziu ligeiramente os níveis de Cullin não dilatado. A mutação dupla CSN5, DEN1 resgata parcialmente a letalidade prematura associada à mutação única CSN5. Estes resultados sugerem que DEN1 regula a nedilação de Cullin suprimindo a atividade da denedilase CSN.

Terça-feira, 6 de outubro

Ullrich, A., Bohme, M. A., Schoneberg, J., Depner, H., Sigrist, S. J. e Noe, F. (2015). Organização dinâmica da sintaxina-1A na zona pré-sináptica ativa. PLoS Comput Biol 11: e1004407. ID PubMed: 26367029
Resumo:
A fusão da vesícula sináptica é mediada por proteínas SNARE formando-se entre a vesícula sináptica (v-SNARE) e a membrana plasmática (t-SNARE), uma das quais é a Sintaxina-1A. Embora a exocitose ocorra principalmente em zonas ativas, a Sintaxina-1A parece cobrir toda a membrana neuronal. Usando microscopia de luz de super-resolução STED e análise de imagem de junções neuro-musculares de Drosophila, este estudo mostra que os aglomerados de Sintaxina-1A são mais abundantes e têm um tamanho aumentado nas zonas ativas. Um modelo baseado em partículas computacionais de formação e dinâmica de cluster de sintaxina é desenvolvido. O modelo é parametrizado para reproduzir as distribuições de tamanho de cluster da Sintaxina encontradas pela análise STED e reproduz com sucesso os resultados FRAP existentes. O modelo mostra que a membrana neuronal é ajustada de forma a atingir um equilíbrio entre ter a maioria das sintaxinas armazenadas em grandes clusters, enquanto ainda mantém uma fração móvel de sintaxinas livre ou em pequenos clusters que podem pesquisar com eficiência a membrana ou ser negociados entre os clusters. Este equilíbrio é sutil e pode ser alterado para quase nenhum agrupamento e agrupamento quase completo, modificando a energia de interação da sintaxina na ordem de apenas 1 kBT. Esta capacidade parece ser explorada em zonas ativas. Os clusters maiores de sintaxina de zona ativa são mais estáveis ​​e fornecem regiões de alta capacidade de encaixe e fusão, enquanto os clusters menores externos podem servir como reserva flexível ou locais de liberação ectópica espontânea.

Ziegler, A. B., Menage, C., Gregoire, S., Garcia, T., Ferveur, J. F., Bretillon, L. e Grosjean, Y. (2015). A falta de ácidos graxos poliinsaturados na dieta causa disfunção de sinapses no sistema visual da Drosophila. PLoS One 10: e0135353. ID PubMed: 26308084
Resumo:
Os ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) são nutrientes essenciais para os animais e necessários para o funcionamento normal do sistema nervoso. A falta de PUFAs pode resultar do consumo de uma dieta deficiente ou de fatores genéticos, que afetam a absorção e o metabolismo de PUFAs. Ambos podem causar disfunção sináptica, que está associada a vários distúrbios. No entanto, existe uma lacuna de conhecimento que liga essas disfunções neuronais e seus mecanismos moleculares subjacentes. Por sua manipulabilidade genética e seu cultivo fácil, rápido e barato, a Drosophila melanogaster surgiu como um excelente organismo modelo para triagens genéticas, ajudando a identificar as bases genéticas de tais eventos. Como um primeiro passo para a compreensão das implicações de PUFA na fisiologia sináptica de Drosophila, um meio de reprodução contendo apenas quantidades muito baixas de PUFAs foi projetado. O sistema visual da mosca, um modelo bem estabelecido para estudar a transmissão de sinais e distúrbios neurológicos, foi usado para medir os efeitos de uma deficiência de PUFA na função sináptica. Usando o desempenho visual e a eletrofisiologia do olho, foi descoberto que a deficiência de PUFA afetou fortemente a transmissão sináptica no sistema visual da mosca. Esses defeitos foram resgatados por dietas contendo PUFAs ômega-3 ou ômega-6 isoladamente ou em combinação. Em resumo, manipular o conteúdo de PUFA na dieta da mosca foi poderoso para investigar o papel desses nutrientes na função sináptica visual da mosca. Este estudo tem como objetivo mostrar como a primeira sinapse visual de Drosophila pode servir como um modelo simples para estudar os efeitos dos PUFAs na função das sinapses. Uma abordagem semelhante poderia ser usada para rastrear fatores genéticos subjacentes aos mecanismos moleculares de disfunções sinápticas associadas a níveis alterados de PUFA.

Segunda-feira, 5 de outubro

Rabinovich, D., Mayseless, O. e Schuldiner, O. (2015). Cultivo ex vivo de longo prazo do cérebro de Drosophila como um método para imagens ao vivo de cérebros de pupas: insights sobre os mecanismos celulares da remodelação neuronal. Front Cell Neurosci 9: 327. PubMed ID: 26379498
Resumo:
A investigação sobre a remodelação estereotípica do corpo do cogumelo da Drosophila (MB) e neurónios gama contribuiu para o conhecimento dos mecanismos moleculares da remodelação, mas o conhecimento dos mecanismos celulares permanece pouco compreendido. Um grande obstáculo na compreensão de vários processos dinâmicos que ocorrem durante a metamorfose é a falta de resolução de lapso de tempo. A caixa pupal e os corpos gordurosos opacos que envolvem o sistema nervoso central (SNC) tornam impossível a obtenção de imagens ao vivo do cérebro central in vivo. Este estudo descreve um sistema de cultura cerebral ex vivo de longo prazo que apoia o desenvolvimento e a remodelação neuronal dos cérebros das pupas. Ao otimizar as condições de cultura e protocolos de dissecção, o desenvolvimento foi observado em cultura em cinética semelhante ao que ocorre in vivo. Usando este novo método, a primeira sequência de lapso de tempo de neurônios gama MB em remodelação foi observada em até uma resolução de célula única. Descobriu-se que a poda de axônio era iniciada por bolhas, seguida por um ou dois cortes que parecem iniciar uma fragmentação de axônio mais amplamente espalhada. O sistema de cultura cerebral ex vivo de longo prazo pode ser usado para estudar aspectos dinâmicos do neurodesenvolvimento de qualquer neurônio Drosophila.

Valmalette, J. C., Raad, H., Qiu, N., Ohara, S., Capovilla, M. e Robichon, A. (2015). Nanoarquitetura de cerdas quimiossensoriais gustativas e traqueia nas asas de Drosophila. Sci Rep 5: 14198. PubMed ID: 26381332
Resumo:
Na margem anterior da asa da Drosophila, os dendritos dos neurônios gustativos ocupam o interior de cerdas finas e longas que apresentam minúsculos poros em suas extremidades. As funções dessa atividade gustativa permanecem indefinidas e controversas. Este estudo investigou a arquitetura das cerdas quimiossensoriais da asa e da traqueia da asa usando espectroscopia Raman e microscopia de fluorescência. Foi hipotetizado que o cabelo gustativo da asa, um tubo capilar aberto e a traqueia da asa constituem sistemas biológicos semelhantes aos materiais nano-porosos. São apresentadas evidências que argumentam a favor da existência de uma camada ou bolha de ar abaixo do poro no interior do cabelo gustativo. Esses cabelos ocos e tubos traqueais em asa cumprem condições para as quais a física dos fluidos aplicados a capilares abertos e materiais porosos são relevantes. Os cabelos gustativos das asas e as arquiteturas traqueais mostraram-se capazes de capturar moléculas voláteis do ambiente, o que pode aumentar a eficiência de sua detecção espacial por meio de vibrações das asas ou durante o vôo.

Domingo, 4 de Outubro

Marco, A. (2015). Seleção contra locais alvo de microRNA maternos em transcrições maternas. G3 (Bethesda) 5 (10): 2199-207. ID PubMed: 26306531
Resumo:
Em animais, antes de o genoma zigótico ser expresso, o ovo já contém produtos gênicos depositados pela mãe. Esses produtos maternos são cruciais durante as etapas iniciais de desenvolvimento. Em Drosophila melanogaster, um grande número de produtos maternos são encontrados no oócito, alguns dos quais são indispensáveis. Muitos desses produtos são moléculas de RNA, como transcritos de genes e RNAs ribossômicos. Recentemente, microRNAs - pequenos reguladores de genes de RNA - foram detectados no início do desenvolvimento e são importantes nessas etapas iniciais. A presença de alguns microRNAs em ovos não fertilizados foi relatada, mas se eles têm um impacto funcional no ovo ou embrião inicial não foi explorado. Este estudo extraiu e sequenciou pequenos RNAs de ovos não fertilizados de Drosophila. O ovo não fertilizado é rico em pequenos RNAs e contém vários produtos de microRNA. Os microRNAs maternos são frequentemente codificados dentro do íntron dos genes maternos, sugerindo que muitos microRNAs maternos são o produto de problemas transcricionais. Análises genômicas comparativas sugerem que os transcritos maternos tendem a evitar locais-alvo para microRNAs maternos. Um modelo de mutação alvo de microRNA foi desenvolvido para estudar o impacto funcional de polimorfismos em sítios alvo de microRNA. A análise das populações de Drosophila sugere que há seleção contra sítios-alvo de microRNA maternos em transcritos maternos. Um papel potencial do microRNA materno mir-9c na transição materno-zigótica também é discutido. Em conclusão, microRNAs maternos em Drosophila têm um impacto funcional nas transcrições codificadoras de proteínas maternas.

Bertin, B., Renaud, Y., Aradhya, R., Jagla, K. e Junion, G. (2015). TRAP-rc, traduzindo purificação de afinidade de ribossomo de populações de células raras de embriões de Drosophila. J Vis Exp [Epub antes da impressão]. ID PubMed: 26381166
Resumo:
Medir os níveis de mRNAs no processo de tradução em células individuais fornece informações sobre as proteínas envolvidas nas funções celulares em um determinado momento. O protocolo denominado Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) é capaz de capturar este processo de tradução de mRNA de uma maneira específica para o tipo de célula. Com base na purificação de afinidade de polissomos que carregam uma subunidade ribossômica marcada, TRAP pode ser aplicado a análises de translatomo em células individuais, tornando possível comparar os tipos de células durante o curso dos processos de desenvolvimento ou acompanhar o progresso do desenvolvimento da doença e o impacto de potenciais terapias em nivel molecular. Este estudo relata uma versão otimizada do protocolo TRAP, chamado TRAP-rc (células raras), dedicado a identificar RNAs envolvidos na tradução de populações de células raras. TRAP-rc foi validado usando o sistema de direcionamento Gal4 / UAS em uma população restrita de células musculares em embriões de Drosophila. Este novo protocolo permite a recuperação de RNA específico do tipo de célula em quantidades suficientes para análises de expressão gênica global, como microarrays ou RNA-seq. A robustez do protocolo e as grandes coleções de drivers Gal4 tornam o TRAP-rc uma abordagem altamente versátil com aplicações potenciais em estudos de genoma específicos de células.

Sábado, 3 de outubro

Babcock, D. T. e Ganetzky, B. (2015). Propagação transcelular de agregados de huntingtina no cérebro de Drosophila. Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (39): E5427-33. ID PubMed: 26351672
Resumo:
Uma característica chave de muitas doenças neurodegenerativas é o acúmulo e subsequente agregação de proteínas mal dobradas. Estudos recentes destacaram a propagação transcelular de agregados de proteínas em várias doenças neurodegenerativas importantes, embora os mecanismos precisos subjacentes a essa disseminação e como ela se relaciona com a patologia da doença permanecem obscuros. Este estudo usou uma forma expandida de poliglutamina de huntingtina humana (Htt ver Drosophila Huntingtin) com uma etiqueta fluorescente para monitorar a disseminação de agregados no cérebro de Drosophila em um modelo de doença de Huntington. Após a expressão desta construção em um subconjunto definido de neurônios, foi demonstrado que os agregados de proteína se acumulam nos terminais sinápticos e se espalham progressivamente por todo o cérebro. Esses agregados são internalizados e se acumulam em outros neurônios. Os agregados Htt causam patologia não autônoma da célula, incluindo a perda de neurônios vulneráveis ​​que podem ser evitados pela inibição da endocitose nesses neurônios. Finalmente, foi demonstrado que a liberação de agregados requer proteína de fusão 1 sensível a N-etilmalemida, demonstrando que a liberação ativa e a absorção de agregados Htt são elementos importantes de disseminação e progressão da doença.

Obata, F. e Miura, M. (2015). O aumento do catabolismo de S-adenosil-metionina estende a vida útil da Drosophila. Nat Commun 6: 8332. ID PubMed: 26383889
Resumo:
A restrição de metionina estende a vida útil de vários organismos modelo. Limitar a síntese de S-adenosil-metionina (SAM), a primeira reação metabólica da metionina na dieta, estende a longevidade em Caenorhabditis elegans, mas acelera a patologia em mamíferos. Este estudo mostra que, como uma alternativa para inibir a síntese de SAM, o aumento do catabolismo de SAM pela Glicina N-metiltransferase (Gnmt) estende a vida útil em Drosophila. O Gnmt protege fortemente os níveis sistêmicos de SAM ao produzir sarcosina em condições de alta metionina ou baixa sams. Durante o envelhecimento, os níveis sistêmicos de SAM nas moscas aumentam. Gnmt é induzido transcricionalmente de uma maneira dependente de dFoxO, no entanto, isso é insuficiente para suprimir a elevação de SAM completamente em moscas velhas. Superexpressão de gnmt suprime esse aumento de SAM dependente da idade e estende a longevidade. Os regimes de pró-longevidade, como restrição alimentar ou redução da sinalização da insulina, atenuam o aumento de SAM dependente da idade e contam, pelo menos parcialmente, com a função Gnmt para exercer seu efeito de prolongamento da vida em Drosophila. Este estudo sugere que a regulação dos níveis de SAM por Gnmt é um componente-chave da extensão da vida útil.

Sexta-feira, 2 de outubro

Li, M., Ma, Z., Liu, J. K., Roy, S., Patel, S. K., Lane, D. C. e Cai, H. N. (2015). Um centro organizacional de loops de cromatina regulados pelo desenvolvimento no complexo Drosophila Antennapedia. Mol Cell Biol 35 (23): 4018-29. ID PubMed: 26391952
Resumo:
O padrão de expressão complexo do gene homeótico de Drosophila Sex combs reduzidos (Scr) é dirigido por uma sequência reguladora incomumente longa abrigando diversos elementos cis e um gene vizinho interveniente fushi tarazu (ftz). Este estudo relata a presença de uma infinidade de elementos de fronteira da cromatina (CBEs) na região reguladora do Scr. O emparelhamento seletivo e dinâmico entre esses CBEs medeia os loops de cromatina regulados pelo desenvolvimento.Em particular, o limite SF1 desempenha um papel central na organização de dois subconjuntos de loops de cromatina: um subconjunto inclui ftz, limitando seu acesso pelos intensificadores de Scr circundantes e compartimentando modificações distintas de histonas e o outro subconjunto subdivide as sequências regulatórias de Scr em domínios de acesso de intensificadores independentes. Emparelhamento tandem de SF1 e SF2, dois CBEs fortes que flanqueiam o ftz domínio, fornecendo um mecanismo para o intensificador de Scr endógeno para contornar o ftz domínio. Este estudo demonstra como uma rede CBE endógena, centralmente orquestrada por SF1, pode remodelar o ambiente genômico para facilitar a regulação do gene durante o desenvolvimento.

Shimaji, K., Konishi, T., Tanaka, S., Yoshida, H., Kato, Y., Ohkawa, Y., Sato, T., Suyama, M., Kimura, H. e Yamaguchi, M. ( 2015). Identificação em todo o genoma de genes-alvo da histona metiltransferase dG9a durante a embriogênese de Drosophila. Genes Cells 20 (11): 902-14. ID PubMed: 26334932
Resumo:
A modificação pós-tradução da histona desempenha papéis importantes na regulação epigenética de vários processos biológicos. Entre as histonas metiltransferases (HMTases) identificadas, G9a é um exemplo específico da histona H3 Lys 9 (H3K9) ativo em regiões eucromáticas. Foi relatado que Drosophila G9a (dG9a) apresenta atividade de dimetilação de H3K9 in vivo. Este estudo mostra que o tempo necessário para a eclosão de um mutante nulo homozigoto dG9a e combinação heteroalélica de mutantes nulos dG9a é atrasado, sugerindo que dG9a é pelo menos parcialmente responsável pela progressão da embriogênese. As análises imunocitoquímicas do tipo selvagem e das moscas mutantes nulas de dG9a indicaram que dG9a se localiza no citoplasma até o ciclo de divisão nuclear 7, onde é provavelmente responsável pela di-metilação de H3K9 sem nucleossomo. Dos ciclos 8-11, o dG9a move-se para o núcleo e é responsável pela di-metilação do H3K9 nos nucleossomos. A análise da sequência de RNA utilizando embriões mutantes dG9a e de tipo selvagem inicial mostrou que dG9a regula negativamente a expressão de genes responsáveis ​​pela embriogênese. A análise de hibridização in situ fluorescente de RNA mostrou ainda que os padrões de expressão temporal e espacial desses mRNAs não mudaram significativamente no mutante dG9a. Esses resultados indicam que o dG9a controla os níveis de transcrição de alguns genes zigóticos sem alterar os padrões de expressão temporal e espacial dos transcritos desses genes.

Quinta-feira, 1 de outubro

Ng, W.C., Chin, J.S., Tan, K.J. e Yew, J.Y. (2015). A ligação elongase de ácido graxo é essencial para Drosófila síntese de feromônios sexuais e fertilidade masculina. Nat Commun 6: 8263. PubMed ID: 26369287
Resumo:
Os insetos usam uma variedade espetacular de sinais químicos para guiar seus comportamentos sociais. Como essa diversidade química surge é um problema antigo na biologia evolutiva. Este estudo descreve a contribuição da ligação de elongase de ácido graxo para a diversidade de feromônios e a fertilidade masculina em Drosófila. A manipulação genética e a análise de espectrometria de massa revelam que a perda de ligação elimina o feromônio sexual masculino (3R, 11Z, 19Z) -3-acetoxi-11,19-octacosadien-1-ol (CH503). Inesperadamente, silenciando ligação a expressão suprime severamente a fertilidade masculina e a fertilidade de rivais da mesma espécie. Esses déficits são resgatados na expressão ectópica de ligação no sistema reprodutor masculino. Uma análise comparativa entre seis Drosófila espécie mostra que o ganho de um novo local de iniciação da transcrição está correlacionado com ligação expressão no bulbo ejaculatório, um local primário de produção de feromônios masculinos. Tomados em conjunto, esses resultados indicam que a modificação dos elementos cis-reguladores e subsequentes mudanças no padrão de expressão do gene é um mecanismo pelo qual surge a diversidade de feromônios.

Liu, G., Sanghavi, P., Bollinger, K. E., Perry, L., Marshall, B., Roon, P., Tanaka, T., Nakamura, A. e Gonsalvez, G. B. (2015). A captação endocítica e maturação eficientes em oócitos de Drosophila requerem Dynamitin / p50. Genetics 201 (2): 631-49. ID PubMed: 26265702
Resumo:
Dynactin é um complexo de múltiplas subunidades que funciona como um regulador do motor Dynein. Um componente central deste complexo é Dynamitin / p50 (Dmn). Dmn é necessário para a motilidade do endossoma em linhas de células de mamíferos. No entanto, não se sabe até que ponto o Dmn participa da classificação da carga por meio do sistema endossômico. Este estudo examinou o papel endocítico de Dmn usando o oócito de Drosophila melanogaster como modelo. As proteínas da gema são internalizadas no oócito via endocitose mediada pela clatrina, trafegadas pela via endocítica e armazenadas em grânulos de gema condensados. Oócitos com depleção de Dmn continham menos grânulos de gema do que os controles. Além disso, esses oócitos acumularam numerosas estruturas endocíticas intermediárias. Particularmente proeminentes eram os endossomos aumentados que eram relativamente desprovidos de proteínas da gema. Análises ultraestruturais e genéticas indicam que os intermediários endocíticos são produzidos a jusante de Rab5. Fenótipos semelhantes foram observados após o esgotamento da cadeia pesada de Dineína (Dhc) ou Lis1. Dhc é a subunidade motora do complexo Dynein e Lis1 é um regulador da atividade Dynein. Propõe-se, portanto, que Dmn desempenhe sua função na endocitose por meio do motor Dynein. Consistente com um papel da Dineína na endocitose, o motor co-localizado com a maquinaria endocítica no córtex do oócito de uma maneira dependente da endocitose. Esses resultados sugerem um modelo pelo qual a atividade endocítica recruta Dineína para o córtex do oócito. O motor, juntamente com seus reguladores, Dynactin e Lis1, funcionam para garantir a captação e maturação endocíticas eficientes.


A consciência

Existem muitos modelos perfeitos nas plataformas sociais, seja no Instagram ou no Tiktok. Todos esses modelos e influenciadores parecidos com deusas nos fizeram acreditar que apenas a técnica certa de aplicar maquiagem e fazer alguns abdominais é tudo de que precisamos para parecer tão bonitos e perfeitos quanto eles. A realidade está muito longe disso. A comunidade da beleza e os amantes da maquiagem de todo o mundo perceberam que camadas pesadas de base, corretivos e bolos não vão criar mágica. Nenhum dos dois está se exercitando sozinho o suficiente para lhe fornecer esse corpo de sonho.

Em um mundo realista, a maquiagem desgasta, nossos poros existem, nossa pele parece caída quando usamos bases de cobertura total, temos rostos assimétricos, pêlos faciais indesejados, gorduras teimosas e a lista continua. Então, como as modelos, celebridades e influenciadores estão conseguindo tudo isso?

Vivemos em um mundo de filtros de câmera e aplicativos de edição de vídeo incríveis que podem mudar a aparência de qualquer pessoa em segundos. As características faciais e formas do corpo podem ser alteradas com alguns toques. O photoshopping está mais indetectável do que nunca. Existem aplicativos de vídeo que podem fazer você parecer muito alto ou muito magro com apenas um clique. Tudo isso significa que não devemos acreditar em tudo o que vemos nas redes sociais.


Assista o vídeo: Chega de PELOS NO ROSTO! Dicas Naturais (Novembro 2021).