Em formação

Potencial para destruir vírus usando príons?


Poderia um príon ser usado para deformar suficientemente uma proteína viral a fim de tornar o vírus uma parte incapaz de se reproduzir? Por exemplo, pegue a proteína VP1 do resfriado comum e transforme-a em um príon e, em seguida, injete esse príon em alguém com resfriado. Esse príon entraria em contato com o vírus? Isso realmente deformaria o vírus? Podemos fazer príons?


Os príons são "versões" mal dobradas de proteínas já presentes no genoma. Eles tendem a se ligar a suas contrapartes devidamente dobradas e catalisar seu dobramento incorreto em príons. Embora improvável, não é impossível imaginar que eles possam interagir com outras macromoléculas. Dito isso, injetar partículas priônicas em humanos por qualquer motivo (especialmente em um ensaio clínico para o resfriado comum) é EXTREMAMENTE improvável. Mesmo se você provar que funciona em modelos animais, injetar uma pessoa seria considerado muito arriscado. Além disso, o "benefício" disso seria marginal - curar o resfriado comum, do qual> 99% das pessoas se recuperam mesmo sem qualquer medicação. Dado que há um grande risco e muito pouco benefício, provavelmente nunca saberemos com certeza quão viável isso é (pelo menos para o resfriado comum). Como conceito, poderia funcionar, mas seria extremamente difícil de acertar.


Doença de príon de parada química simples

A vaca louca, o tremor epizoótico e a doença de Creutzfeld-Jakob são doenças do cérebro que debilitam antes de matar e não têm cura, ou mesmo muitas boas opções de tratamento além de cuidados de suporte. Mas agora, pesquisadores na Suíça dizem que é possível bloquear as proteínas mal dobradas chamadas príons que causam essas doenças, usando um composto que os biólogos usaram para rastrear outras moléculas.

Os príons são um tipo distinto de proteína - eles podem se auto-replicar, disse Adriano Aguzzi, professor de neuropatologia da Universidade de Zurique, que liderou o estudo. Quando um príon entra em contato com uma proteína normal, ele faz com que a proteína normal altere sua forma e se torne um príon também. A vaca louca e o tremor epizoótico afetam vacas e ovelhas, respectivamente, e a doença de Creutzfeld-Jakob (CJD) afeta pessoas.

No novo estudo, a equipe de Aguzzi usou produtos químicos chamados politiofenos conjugados luminescentes, que são compostos fluorescentes que os pesquisadores costumam usar para tingir amostras de tecido, para que possam ver o que está acontecendo nas células. A equipe primeiro infectou ratos com uma doença de príon e, em seguida, injetou politiofenos neles.

Eles descobriram que alguns politiofenos aumentaram a sobrevivência dos ratos em mais de 80 por cento, em comparação com os ratos controle que não foram injetados com politiofenos.

Isso significa que alguns camundongos sobreviveram até 140 dias após a infecção se contraíram o politiofeno antes de serem infectados com príons, e até 100 dias se foram tratados após a infecção. "Fiquei muito surpreso por ter funcionado tão bem", disse Aguzzi.

Os príons infecciosos entram no cérebro depois que pessoas ou animais comem alimentos contaminados com eles. Eventualmente, as proteínas se replicam a ponto de formarem placas que podem matar células cerebrais e dar ao cérebro a aparência "esponjosa" característica das doenças priônicas (as doenças são formalmente chamadas de encefalopatias espongiformes transmissíveis). [10 coisas que você não sabia sobre o cérebro]

Exatamente como os príons matam as células ainda está em debate, disse Aguzzi, mas não há dúvida de que as proteínas se replicam rapidamente quando começam a se ligar a certas proteínas nas células cerebrais, e leva apenas alguns príons para iniciar o processo.

Os príons também são muito difíceis de se livrar. As moléculas estão fortemente ligadas, mesmo as temperaturas da água fervente não as quebram.

No estudo, Aguzzi disse que a equipe fez extensas simulações de computador de como as moléculas interagem antes de serem injetadas nos animais, para aprender as "regras" de como os produtos químicos interagem com os príons.

O trabalho se baseia em experimentos feitos por Beat Meier, pesquisador do Instituto Federal de Tecnologia da Suíça, disse Aguzzi. Meier usou imagens moleculares para descobrir a estrutura ou os príons infecciosos em 2008. "Ninguém olhou para a ligação antes, porque ninguém conhecia a estrutura de um príon antes."

Outra etapa foi um projeto estudando um problema completamente diferente. Peter Nilsson, um biólogo químico da Link & oumlping University, na Suécia, estava fazendo experiências com plásticos condutores, mas encontrou um produto químico que ele pensou que poderia se ligar a príons.

Simulações de computador mostraram que os politiofenos podiam de fato caber em um espaço encontrado em uma extremidade de um príon e impedi-lo de se conectar com proteínas normais.

Resta saber se os politiofenos podem ser administrados com segurança às pessoas - sua toxicidade ainda não é conhecida, e ainda mais longe estão os testes que estudam se eles podem ser eficazes em ajudar as pessoas com CJD.

As substâncias descritas no novo estudo não são necessariamente as que entrarão nos humanos ", observou Aguzzi. No entanto, as novas descobertas mostram que há um caminho para a produção de moléculas que poderiam interromper as doenças causadas pelos príons.

O estudo foi publicado na edição de hoje (5 de agosto) da Science Translational Medicine.


O que é vírus?

O vírus é uma partícula infecciosa de tamanho nanométrico que compõe um revestimento de proteína e ácidos nucléicos. Assim, os ácidos nucleicos virais podem ser DNA ou RNA. Os ácidos nucleicos podem ser de cadeia simples ou dupla. Além disso, eles podem ser lineares, circulares ou segmentados. Estruturalmente, os ácidos nucléicos permanecem protegidos dentro do capsídeo da proteína. O capsídeo da proteína pode conter pontas e caudas. Essas pontas e caudas ajudam os vírus a se ligarem às células hospedeiras.

Com base no arranjo do capsídeo da proteína, os vírus têm diferentes formas, como estruturas helicoidais, icosaédricas, poliédricas e complexas. Além dos ácidos nucléicos e do capsídeo da proteína, alguns vírus possuem um envelope que envolve o nucleocapsídeo. Assim, existem vírus envelopados, enquanto outros são vírus simples. Usando esses ácidos nucléicos, os vírus se multiplicam dentro de um organismo vivo (hospedeiro) por meio de cinco etapas de fixação, penetração, replicação e síntese, montagem e liberação. Portanto, eles são parasitas obrigatórios. Em palavras simples, os vírus precisam de um hospedeiro vivo para produzir proteínas e se multiplicar.

Figura 01: Vírus

Existem diferentes tipos de vírus com base no organismo hospedeiro que eles usam para se multiplicar. Um bacteriófago é um tipo que infecta bactérias. Os micovírus infectam fungos enquanto os vírus archaea infectam archaea. Além disso, existem vírus animais, vírus vegetais, vírus protistas e retrovírus endógenos de mamíferos. Como o nome sugere, esses vírus usam diferentes organismos hospedeiros para se multiplicar, causando doenças neles.


Lindquist Lab mostra como as proteínas de príon matam os neurônios

CAMBRIDGE, Massachusetts - Doenças de príons - como a doença da vaca louca em gado e a doença de Creutzfeldt-Jakob (CJD) em humanos - confundiram os cientistas por décadas com um complexo policial completo com muitos suspeitos e uma arma do crime desaparecida. Ao contrário de outras doenças infecciosas ligadas a patógenos, como bactérias e vírus, essas doenças têm uma conexão única e misteriosa com uma proteína mal dobrada.

O cérebro de uma vítima morta por doenças de príon é normalmente obstruído com aglomerados de proteína de príon (PrP) em um estado raro e mal dobrado chamado PrPSc. A controvérsia existe há muito tempo sobre como essas doenças começam e se os aglomerados de PrPSc realmente matam as células cerebrais - em algumas formas da doença, os aglomerados nem mesmo existem. O culpado pela morte de neurônios ainda é um mistério.

A pesquisa da Diretora do Instituto Whitehead, Susan Lindquist e Jiyan Ma, professora assistente da Ohio State University, sugere uma teoria unificadora que pode ajudar a explicar como essas doenças devastadoras começaram e como elas matam. Os resultados, publicados em dois artigos na edição online da revista Science de 17 de outubro de 2002, mostram que pequenas quantidades de PrP que se acumulam no espaço celular, chamadas de citosol, matam neurônios em células em cultura e camundongos transgênicos. Os camundongos sofreram de neurodegeneração e perda de controle muscular, semelhante a pacientes com CJD e outras doenças priônicas. Os agregados de PrPSc são separados desta espécie tóxica e não são diretamente responsáveis ​​pela morte celular.

O PrP normalmente fica na superfície da célula. Mas se ela se dobrar incorretamente antes de chegar à superfície, o mecanismo de controle de qualidade da célula a envia para o citosol para destruição. A nova pesquisa mostra que, se o sistema de controle de qualidade ficar sobrecarregado, mesmo uma pequena quantidade de PrP no citosol matará o neurônio.

Em um documento anexo, o laboratório relata também que, quando o PrP mal dobrado se acumula no citosol, às vezes pode se converter na forma grumosa do tipo PrPSc. Uma característica fundamental da hipótese do príon é a natureza "infecciosa" de sua mudança de forma - uma vez que o PrPSc se forma, ele pode induzir outras proteínas príon a esse padrão de dobramento alternativo e fazer com que se agrupem. Lindquist e Ma descobriram um mecanismo pelo qual essa mudança de forma infecciosa pode começar e demonstrar seu caráter de autopropagação.

Juntos, os dois artigos estabelecem um mecanismo de como o PrP normal pode se converter em uma forma altamente tóxica que mata neurônios e é diferente da forma PrPSc autopropagada da proteína. "Esta é uma visão inteiramente nova das espécies tóxicas", disse Lindquist. "Achamos que essa toxicidade não foi percebida antes simplesmente porque essas pequenas quantidades de PrP são necessárias para a morte celular e outras formas da proteína estão presentes em concentrações muito mais altas."

Proteínas Príon Mamífero

A doença da vaca louca chamou a atenção dos cientistas em 1986, quando uma epidemia eclodiu em rebanhos bovinos britânicos de uma nova doença neurológica. Quase 10 anos depois, os temores aumentaram quando jovens, principalmente na Grã-Bretanha, contraíram a doença, aparentemente por comer carne infectada. (Em pessoas, a doença era encontrada anteriormente apenas em idosos.) Até o momento, aproximadamente 150 jovens contraíram essa nova variante da doença de Creutzfeldt-Jakob. Embora os cientistas esperem que esse número continue pequeno, é difícil dizer, já que o período de incubação pode chegar a 20 anos. Recentemente, uma doença relacionada, conhecida como "doença debilitante", tem se espalhado pelos Estados Unidos em populações de cervos e alces.

Todos os mamíferos, incluindo humanos, produzem a proteína príon PrP, mas o estado raro e mal dobrado (PrPSc) é encontrado apenas em mamíferos com doenças príon transmissíveis. Notavelmente, essa mudança de forma parece ser contagiosa, convertendo outras moléculas PrP normais na conformação PrPSc e fazendo com que elas se agregem. Mas o mecanismo para desencadear a rara conformação PrPSc inicial era desconhecido.

A própria ideia de príons incomoda muitos cientistas porque viola o princípio fundamental de que a presença de ácidos nucléicos, como o DNA, é essencial tanto para a herança quanto para a infecção. No entanto, os príons produzem aglomerados no cérebro que são infecciosos, embora nenhum ácido nucleico pareça estar envolvido.

Acredita-se que o PrPSc seja o agente infeccioso nas formas transmissíveis da doença, responsável por iniciar a cadeia mortal de eventos de dobramento incorreto do PrP. Mas, PrPSc não parece ser diretamente responsável por matar neurônios. O PrPSc não é observado em várias formas de doença herdadas e induzidas experimentalmente e o PrPSc não é tóxico quando injetado em camundongos geneticamente alterados que não produzem sua própria proteína PrP.

Está tudo na dobra

As proteínas são a base da vida, fornecendo os blocos de construção, as partes móveis e a energia que move o motor. Como simples folhas de papel que se dobram em figuras de origami, as proteínas se dobram em uma vasta gama de formas complexas e belas. Às vezes, uma proteína se dobra incorretamente por acaso, outras vezes, uma mutação na proteína torna mais provável que ela seja dobrada incorretamente. Como as proteínas mal dobradas podem causar o mau funcionamento de uma célula, a célula usa um sistema de controle de qualidade rigoroso para eliminá-las.

O PrP mal dobrado, por exemplo, não é transportado para a superfície da célula, seu destino normal. Em vez disso, quando a célula detecta o PrP mal dobrado, ele é cuspido no espaço celular denominado citosol. Lá, máquinas de degradação de proteínas chamadas proteassomas atuam como trituradores de lixo para eliminar proteínas mal dobradas. Normalmente, o PrP é degradado tão rapidamente que é indetectável. No entanto, quando a atividade do proteassoma é comprometida, como pode ocorrer naturalmente com o estresse e o envelhecimento, o PrP se acumula no citosol.

O laboratório de Lindquist usou inibidores de proteassoma para bloquear o descarte de lixo da célula para ver o que aconteceria quando PrP mal dobrado se acumulasse no citosol. Surpreendentemente, os neurônios morreram antes mesmo de os aglomerados de PrPSc se formarem.

Dependendo da rapidez com que o PrP se acumulou no citosol, às vezes se convertia em uma conformação semelhante ao PrPSc. "Quando as proteínas são entregues ao citosol para destruição, elas são desdobradas", explica Lindquist. "Achamos que a conversão ocorre quando essas moléculas de PrP instáveis ​​e pegajosas encontram outras no mesmo estado. Se um número suficiente delas se reunir ao mesmo tempo, elas podem adquirir essa nova estrutura."

Assim que essa nova conformação apareceu, ela recrutou outras moléculas de PrP para fazer a mesma mudança de forma. As mudanças de forma continuaram ocorrendo mesmo depois que o inibidor foi removido e a degradação de outras proteínas foi retomada. O PrPSc, no entanto, não parecia estar matando os neurônios. Ou seja, a fração de PrP que se converte na forma semelhante a PrPSc não determinou a morte celular.

Este trabalho demonstrou o primeiro mecanismo biológico natural para produzir a conformação PrPSc a partir do zero dentro da célula. Também mostra que a mudança estrutural que se autoperpetua é uma propriedade intrínseca - e incomum - da própria proteína PrP. “Essa é uma descoberta muito importante”, afirma Lindquist. "Mas não prova que a conversão é suficiente para a transmissão de animal para animal. Isso ainda precisa ser testado e esses experimentos podem levar muito tempo."

Em seguida, para evitar artefatos que podem ser causados ​​pelos inibidores, os pesquisadores simplesmente criaram camundongos transgênicos que produziriam a proteína PrP normal diretamente no citosol. Foi mortal. Mesmo pequenas quantidades de PrP solúvel causaram degeneração maciça de neurônios, destruindo rapidamente o cérebro.

Na verdade, a toxicidade do PrP citosólico é tão grande que pode ter evoluído como uma forma de matar neurônios com problemas de dobramento de PrP. Seria melhor para um neurônio individual com problemas de dobramento morrer do que arriscar a possibilidade de o PrP se acumular em níveis suficientes para produzir a forma infecciosa do PrPSc, que poderia então se espalhar para outras células e matar todo o cérebro.

Com uma melhor compreensão de como as doenças por príons se iniciam e progridem, os cientistas serão mais capazes de projetar abordagens terapêuticas para o tratamento.

Implicações para inibidores de proteassoma

O laboratório Lindquist usou inibidores de proteassoma em seus experimentos iniciais para entupir o lixo da célula. Isso forneceu as primeiras pistas do que acontece quando o PrP se acumula no citosol. Vários inibidores de proteassoma estão em testes clínicos por sua capacidade de matar seletivamente as células cancerosas. (Esses inibidores de proteassoma não devem ser confundidos com os inibidores de protease usados ​​na terapia da AIDS, que são uma classe diferente de drogas.) Os artigos de Lindquist e Ma alertam que os inibidores de proteassoma podem matar neurônios e, portanto, devem ser manuseados com cuidado. Eles acrescentam que, como os inibidores em testes clínicos não cruzam a membrana que protege o cérebro, seu potencial de danos é bastante reduzido. A advertência sobre esse perigo oculto pode ajudar no desenvolvimento de terapêuticas ainda mais específicas para o câncer com base nesses inibidores.

Esta pesquisa é financiada pelo National Institutes of Health e Howard Hughes Medical Institute.


Os alces são suscetíveis à infecção CWD.

Em primeiro lugar, o que é um príon? O Dr. Stanley Prusiner descreveu os príons pela primeira vez em 1982 2 e cunhou o termo príon como uma versão mais curta de "partícula infecciosa proteica". [Cara inteligente - ele ganhou o Prêmio Nobel de Medicina em 1997.] Um príon é uma proteína celular normalmente produzida por todos os mamíferos. Nessa forma normal, os príons são relativamente instáveis ​​e são quebrados rapidamente por proteases (enzimas que quebram proteínas e peptídeos). A doença ocorre quando a proteína muda de forma e não é mais decomposta por proteases. Os príons acabam se agregando e envenenando as células cerebrais, fazendo com que morram e formem buracos no cérebro 3.

Existem muitas doenças diferentes de TSE. Alguns são genéticos e ocorrem ao longo de linhas familiares, alguns aparentemente ocorrem espontaneamente (ex. Doença de Creutzfeld-Jakob em humanos), alguns são causados ​​por comportamento alimentar (ex. Doença da "vaca louca"), mas scrapie em ovelhas e CWD em veados, alces , alce e rena são os únicos dois TSEs que são contagiosos (ou seja, transmissíveis via contato) Todas as doenças por príons têm várias características em comum que não combinam com uma bactéria ou vírus como fonte de infecção.


Discussão

Este estudo é a avaliação mais completa de PrDs entre os vírus, exceto para os bacteriófagos 34. Os resultados do nosso estudo destacam algumas características virais anteriormente negligenciadas que podem desempenhar papéis importantes nas infecções virais. Determinamos que mais PrDs podem ser encontrados nos vírus DNA em comparação com seus números nos vírus RNA, e nos vírus com envelope, em comparação com os vírus sem envelope. Isso pode ser parcialmente explicado pelo maior tamanho do genoma e números de proteínas nos vírus de DNA 64.

Identificamos PrDs em proteínas funcionalmente distintas de diferentes ordens virais, indicando que esses PrDs são conservados em vírus diferentes. No entanto, os PrDs não foram identificados em todas as famílias e espécies virais. Nossas análises demonstraram que apenas aproximadamente 23% de todos os proteomas virais analisados ​​disponíveis em bancos de dados públicos contêm pelo menos um PrD, sugerindo que a presença de proteínas contendo PrD pode ser benéfica, mas não obrigatória. Identificamos PrDs em muitos patógenos virais humanos, mas outros vírus que afetam a saúde humana mostraram ter poucos ou nenhum PrDs em seus proteomas, como os vírus da hepatite A, E e D, papilomavírus, alguns membros de Orthomyxoviridae, e outros.

No nível do pedido, mostramos que os PrDs são mais frequentes entre Megavirales e Herpesvirales, enquanto, no nível de espécie, o maior número de PrDs foi encontrado em Acanthamoeba polyphaga mimivírus, Paramecium bursaria Vírus da Chlorella NY2A, Acanthamoeba castellanii mamavírus (Megavirales), e Heliothis zea nudivirus (pedido não atribuído). Entre os patógenos humanos, a maior prevalência de PrD foi encontrada no citomegalovírus e no vírus Epstein-Barr (Herpesvirales) e HIV1 (Retroviridae família, ordem não atribuída) (Tabela complementar 7).

A análise dos 100 melhores PrDs de pontuação, com o maior número de domínios ricos em QN, eles foram considerados os mais comuns entre Mimiviridae, que infecta Acanthamoeba, e Phycodnaviridae, que infectam algas e pertencem ao Megavirales. Destes, apenas algumas proteínas foram Herpesvirales proteínas, enquanto a maioria delas foi mostrada para ser identificada nos vírus da ordem não atribuída. Nenhum vírus humano mostrou ter pontuações LLR acima de 31 e nenhum foi representado no grupo de 100 melhores pontuações LLR. A maioria dessas proteínas não foi caracterizada, com funções ainda desconhecidas e, portanto, a relevância funcional desses achados permanece obscura. Também aplicamos o algoritmo de predição de príons PAPA a esses 100 PrDs de maior pontuação 35,36. A maioria dos dados recebidos pelo PAPA, foi sobreposto com o algoritmo PLAAC, o que está de acordo com estudos anteriores, mostrando que PLAAC e PAPA comumente se sobrepõem, pois ambos os programas foram treinados em proteínas príon de S. cerevisiae 38 No entanto, havia certas diferenças, e alguns PrDs que tinham pontuação PLAAC alta estavam abaixo do ponto de corte de 0,05 do algoritmo PAPA. Tal discrepância pode ser explicada pelo fato de que, embora ambos os programas tenham um alto nível de acurácia de predição para determinação de proteína príon e não-príon, a precisão da análise é inferior a 100% 35,36.

A ordem Megavirales é uma ordem recentemente estabelecida que compreende diversos grupos de vírus de DNA que infectam hospedeiros eucarióticos, os quais são caracterizados por grandes genomas, quase 10 vezes maiores que os do Herpesviridae 48 Aqui, DNA-vírus foram encontrados para abrigar mais príons de alta pontuação, como esperado, mas as altas pontuações LLR obtidas para esses vírus não se devem às sequências de aminoácidos mais longas, mas à presença aumentada de resíduos QN.

Além disso, nosso objetivo foi determinar a correlação entre as funções da proteína contendo PrD e a frequência de PrDs nos proteomas virais encontrados em diferentes famílias virais. A adesão e entrada de ácidos nucléicos virais representam etapas cruciais nas interações vírus-hospedeiro e as proteínas contendo PrD viral mostraram estar envolvidas nesses processos representaram o segundo maior grupo. Identificamos os PrDs nas proteínas de superfície viral que estão envolvidas no contato direto e na fusão dos vírus com a membrana da célula hospedeira, indicando que os PrDs também podem estar funcionalmente implicados nesses processos. Além disso, uma tendência semelhante foi observada anteriormente na distribuição de PrDs em proteínas responsáveis ​​pelas interações bacterianas e bacteriófagos 39. Curiosamente, a maioria dos PrDs foram encontrados em Baculoviridae, os vírus em forma de bastonete. Identificamos PrDs em 56 das 66 espécies conhecidas pertencentes a esta família, indicando que esta alta prevalência de PrDs em uma família viral pode não ser uma coincidência. Portanto, mostramos ainda que um dos PrDs associados à adesão e entrada celular mais frequentemente encontrados em Baculoviridae é a proteína do envelope do vírus derivada da oclusão 66 (ODV-E66), que foi recentemente a primeira condroitina liase viral identificada, uma enzima que degrada a condroitina e está associada à entrada viral 65,66.

De 543 PrDs encontrados associados à interação viral com as células hospedeiras, apenas quatro proteínas foram identificadas nos vírus de plantas (vírus da batata mop-top, vírus do mosaico dasheen, apenas Syngen Nebraska vírus 5 e vírus da doença de Fiji), enquanto nenhuma foram identificados nos vírus fúngicos. Isso pode ser explicado pela presença de parede celular na planta e células fúngicas, requerendo diferentes mecanismos de entrada viral 67. Sabe-se que os vírus de plantas não têm mecanismos específicos de entrada, mas, em vez disso, tiram vantagem da lesão da planta, vetores como insetos, ou por meio de um movimento célula-a-célula da progênie viral na planta infectada 68,69. Tomados em conjunto, os resultados apresentados, mostrando que os PrDs estão presentes nas proteínas de vírus animais que interagem com as membranas celulares, e sua ausência nos vírus vegetais e fúngicos indica que os PrDs identificados associados à adesão e entrada podem ter papéis funcionais importantes.

As proteínas envolvidas na biossíntese viral mostraram abrigar PrDs também. Encontramos numerosos PrDs em diferentes proteínas de ligação a ácidos nucléicos, proteínas com atividade de quinase, reguladores de condensação de cromossomos e outros. Vários PrDs foram encontrados nas polimerases de DNA e RNA, helicases e EBNA1. No entanto, os papéis dos PrDs nas proteínas virais associadas à biossíntese permanecem obscuros, mas podem ser necessários para as interações proteína-ácido nucleico eficientes. Tendência semelhante foi observada nos eucariotos, onde os PrDs mais abundantes podem ser encontrados nas proteínas de ligação ao ácido nucleico 70. Em humanos, as regiões enriquecidas com aminoácidos polarizadas por QN são freqüentemente encontradas nas proteínas de ligação ao RNA e moléculas reguladoras 66. Esses candidatos a príon de ligação ao ácido nucleico são encontrados nas proteínas associadas a distúrbios neurodegenerativos, como esclerose lateral amiotrófica (ELA), doença de Alzheimer e doença de Huntington, e foi sugerido que eles atuem como epicentros de dobramento incorreto 71.

Alguns vírus podem estar implicados na dobragem incorreta do príon em humanos, uma vez que foi observado que o de novo o aparecimento de príons pode ser facilitado por outra proteína 72 contendo PrD. Anteriormente, o vírus do herpes humano mostrou estar associado ao desenvolvimento da doença de Alzheimer, e vários estudos epidemiológicos demonstraram a presença de antígenos HSV1 no líquido cefalorraquidiano de pacientes com doença de Alzheimer 73,74. Pode-se especular que a presença de múltiplos PrDs identificados neste estudo nas proteínas de HSV1, incluindo proteínas de superfície e de ligação de ácido nucleico, pode representar um gatilho de propagação do dobramento incorreto da proteína na doença de Alzheimer. No entanto, mais experimentos são necessários para confirmar isso.

Além disso, detectamos algumas tendências interessantes na distribuição de PrD entre outros grupos funcionais de proteínas virais. A presença de PrDs em proteínas de montagem viral é mais provavelmente importante para a montagem do capsídeo, que é conhecido por ser caracterizado pelo mecanismo de nucleação e crescimento, dependente da cinética de montagem do capsídeo 75. Portanto, os motivos ricos em glutamina, que medeiam as interações proteína-proteína e têm maior potencial para a diversidade conformacional cinética, em proteínas de montagem do capsídeo podem determinar as vias de montagem do complexo proteico do capsídeo 76. A maioria dos PrDs nas proteínas de montagem foi encontrada nos vírus com envelope, enquanto os PrDs nas proteínas estruturais foram predominantemente identificados nos vírus sem envelope. Análises posteriores indicaram o enriquecimento de PrD nas proteínas de montagem, como hexons de proteínas adenovirais da cápside principal, encontradas em diferentes membros de Adenoviridae, incluindo adenovírus humano serótipo 40 (AdV40) 77.

Hexões adenovirais são conhecidos por desempenharem funções múltiplas, incluindo funções estruturais e aquelas associadas às interações célula-hospedeiro. Os PrDs identificados, de acordo com a análise PLAAC, estão localizados em 130-167 aminoácidos no AdV40, o que corresponde parcialmente a uma região variável V1 localizada no loop 1 específico do sorotipo AdV40 78,79. Essas regiões hipervariáveis ​​estão localizadas na superfície dos hexons, e acredita-se que as alças que se projetam do capsídeo estejam implicadas no desencadeamento da resposta imune por meio das interações com as células T específicas do adenovírus humano 68,80,81.

Outra coisa que chamou nossa atenção em termos de montagem viral e propriedades prionogênicas é que em eucariotos, PrDs são conhecidos por estarem implicados na separação de fase líquido-líquido (LLPS) 82,83,84,85. LLPS é conhecido por ser um processo importante na nucleação e crescimento de cristais de proteínas e é sugerido como a primeira etapa para o crescimento do capsídeo viral 86,87. Portanto, a descoberta de PrDs em proteínas associadas ao crescimento do capsídeo viral indica um possível papel dessas propriedades prionogênicas na montagem viral. Uma referência indireta a isso é que a proteína de andaime do capsídeo do citomegalovírus humano, que desempenha um papel estrutural essencial na montagem do capsídeo viral, foi identificada no estudo atual como tendo um PrD e em trabalho recente de Vernon, R. et al., mostrou-se associado à separação de fases 88.

Em vírus, a presença de PrDs pode ser associada às proteínas precursoras de vírus de RNA de sentido positivo, como Picornavirales e Retroviridae. Ao analisar este grupo, detectamos os PrDs em algumas proteínas precursoras, que não foram encontradas nas proteínas funcionais clivadas dessas poliproteínas primárias de Picornavirales. Apenas o enterovírus B mostrou ter os PrDs na poliproteína e na proteína da cápside VP1. Essas observações requerem investigações adicionais, uma vez que não podem ser devidas a uma análise incompleta, já que o banco de dados UniProt contém os dados de muitos Picornavirales proteínas. É provável que certas modificações pós-tradução de poliproteínas precursoras possam resultar na remoção das PrDs durante o processo de maturação.

Além disso, descobriu-se que as proteínas contendo PrD estão associadas à supressão da ativação do complemento do hospedeiro e às alterações induzidas por vírus nas células, incluindo a modulação do processo apoptótico do hospedeiro 82. Identificamos os PrDs nessas proteínas em muitos vírus não relacionados de diferentes hospedeiros. Os PrDs foram identificados principalmente em vírus humanos e de insetos com capacidade demonstrada de estabelecer infecções persistentes: Baculoviridae, HIV1 e Herpesviridae espécies, como HSV1, vírus Epstein-Barr, citomegalovírus e HSV oncogênico8 89,90. Isso indica que os PrDs nessas proteínas podem estar implicados no estabelecimento de infecções virais persistentes e afetar a resposta imune adaptativa.

Tomados em conjunto, identificamos numerosas proteínas contendo PrD putativas em vírus. Embora tenhamos usado um limite baixo de pontuação PLAAC para identificação (ou em outras palavras, até proteínas com uma baixa probabilidade de ser um príon foram incluídas na análise), ainda havia mais de 650 proteínas com pontuação LLR alta acima de 10, que eram as mais candidatos promissores a príons (Tabela Suplementar 8). Observamos padrões de distribuição de PrD consistentes em diferentes famílias e espécies virais, e esses domínios foram identificados em uma variedade de proteínas. No entanto, como foi demonstrado que a maioria dos vírus não possui PrDs, isso mostra que a presença de PrDs é benéfica, mas não obrigatória, o que está de acordo com os resultados obtidos para os PrDs encontrados em bactérias e bacteriófagos 32,34. Análises adicionais são necessárias para elucidar o papel dos PrDs identificados em proteínas virais, principalmente aquelas encontradas em patógenos virais humanos.

A abordagem preditiva empregada neste estudo revelou pela primeira vez um grande conjunto de PrDs putativos em numerosas proteínas dos patógenos virais humanos emergentes, incluindo aqueles associados a infecções virais persistentes, processos oncogênicos, febres hemorrágicas e outros. Análises adicionais dessas proteínas contendo PrD podem melhorar nossa compreensão das infecções virais, e elas precisam ser expandidas junto com a descoberta de novas espécies virais no projeto Virome 91,92,93,94.


Os príons são eternos

O cérebro da holandesa de 55 anos simplesmente não parecia estar funcionando direito. Sua memória e concentração estavam diminuindo. Ela começou a sentir dores de cabeça e a ouvir e ver coisas que não existiam. Ela teve dificuldade para falar, então ficou muda. Ela desenvolveu sinais de doença de Parkinson e rsquos.

Os cientistas estavam curiosos sobre o que havia. Em vez de congelar seu cérebro, eles o imergiram no conservante químico formaldeído & ndash, que reticula os aminoácidos em proteínas, & ldquofixa-os & rdquo - por três longos dias. Eles cortaram em fatias finas e colocaram os pedaços em parafina. Depois de examinar o tecido ao microscópio e formar uma opinião, eles arquivaram as lâminas e ficaram vários anos em temperatura ambiente.

Um segundo grupo de cientistas adquiriu as lâminas e extraiu parte do tecido seco preservado. Eles diluíram e injetaram a solução em camundongos. Para sua surpresa, quatro dos oito ratos injetados desenvolveram sinais da doença de mulher e rsquos, apesar de um regime de processamento brutal que deveria ter sido suficiente para matar praticamente qualquer patógeno.

Este exemplo mais recente publicado apenas em fevereiro - de resistência bioquímica que prejudica a credibilidade chamou minha atenção algumas semanas atrás. Ele ressalta o incrível poder dos príons.

Proteínas Infecciosas

Um príon é uma proteína mal dobrada que induz a doenças. Depending on how it is misfolded, the prion may also be infectious, and they often are.

Oddly enough, all known prion diseases but one are caused by changes to a solteiro mammalian protein, the somewhat confusingly-named &ldquoprion protein&rdquo. This protein, in its healthy, properly-folded state, is, if not trivial, relatively unimportant. Its complete loss is certainly not catastrophic.

Yet in a highly unfortunate accident of nature, this protein stirs up an extraordinary amount of trouble when broken. When mutated or misfolded in one of 34 known ways, it becomes a prion proper. When a prion bumps into a normal prion protein, the prion protein&rsquos shape metamorphoses to the diseased form. Like a zombie, now it, too, can create more prions.

This, at least, is the prion hypothesis as promulgated by biologist Stanley Prusiner, who won the Nobel Prize in Medicine in 1997 for the idea. The ensuing chain reaction drives a relentless conversion of normal prion proteins into prions. In many prion diseases, the shape of the prion also drives them to polymerize into fibers called amyloid (erroneously and confusingly named after starches in the 19 th century because early tests had trouble distinguishing them, but having nothing to do with starches in reality).

Amyloid fibers accumulate outside cells, where they may punch holes in brain tissue that cause a swiss-cheese-like situation (which certainly happens with or without their help). Or they may be toxic in some other way that generates the neural degeneration and brain atrophy seen in prion diseases. In the case of variant Creutzfeldt-Jakob disease (seen at the top of this post), the fibrils of the amyloid plaques radiate from a central point, giving them the appearance of tribbles.

Prion protein, for reasons again unknown, has a remarkably similar structure among mammals, which provides it a passport to interspecies mischief. Famous prion diseases include mad cow disease (a.k.a. bovine spongiform encephalopathy, contracted when cattle were given feed laced with sheep that had died of the prion disease scrapie note that cattle are vegetarians) kuru (infamously contracted by people who ritually consuming the brains of dead relatives in Papua New Guinea), and variant Creutzfeldt-Jakob Disease (acquired by people who ate Mad-Cow-infected beef).

Prion diseases are universally dreaded because they are uniformly lethal. Once symptoms appear, they cause a relatively swift full-system shut down that may include, in addition to the symptoms the Dutch woman experienced, uncontrolled drooling, uncoordinated movement, and convulsions. It is not a nice way to go, and you will go.

The Stainless Steel Vector

Avoiding this awful, if improbable, fate is something you unfortunately have little control over.

Prion diseases are most commonly acquired by inheriting a faulty prion protein gene from a parent, consuming prion-contaminated food, or receiving prion-contaminated donor tissues or organs.

But there is a final disturbing transmission possibility, one that stems from prions' mind-boggling powers of endurance.

Those powers are considerable. According to one account, prions resist digestion by protein-cleaving enzymes, may remain infectious for years when fixed by drying or chemicals, can survive 200°C heat for 1-2 hours, and become glued to stainless steel within minutes. Oh, and they&rsquore also resistant to ionizing radiation.

Por que estão prions so hard to kill (if kill is even the right word for an evil protein meme)?

No one knows for sure. One expert hypothesized that because our decontamination methods have always targeted DNA and RNA &ndash molecules possessed by all actual living creatures -- they are by design not as effective on proteins.

The structure of prions themselves may also lend them supernatural survival powers. Just 3% of a prion protein is composed of beta-sheets, a common fold. But 43% of a prion is so folded. Such a substantial percentage makes the protein highly resistant to degradation, the reasoning goes. The herding of prions into chain-linked amyloid fiber may also protect them from assault.

Whatever the cause, prions are, to put it mildly, good survivors. And that may be why neurosurgical equipment can remain infectious even after it undergoes standard sterilization.

At least 2 cases of prion disease were contracted by people whose implanted depth electrodes had been previously used on a patient with Creutzfeldt-Jakob but were &ldquoinadequately&rdquo cleaned with benzene and disinfected with 70% alcohol and formaldehyde and sat unused for 2 years prior to implantation. And at least nine other cases of spontaneous Creutzfeldt-Jakob seem likely to have been contracted from inadequately sterilized medical equipment.

What is actually required to remove prions from medical equipment could best be described as destructive at best and draconian at worst and usually involves large quantities of sodium hydroxide or bleach (which is very hard on stainless steel), heat, and pressure, but even these measures are not 100% certain to get the job done. The World Health Organization recommends disposing of any suspected contaminated equipment entirely.

Standard sterilization routines tenho improved since most of the suspected surgical transmission cases occurred. And it should be heartily emphasized that the number of strongly suspected or confirmed cases of surgical prion transmission is tiny.

But because the incubation period of prion diseases can be decades, patients with prion diseases don&rsquot always know they are ill when operated on, and hospitals still don&rsquot routinely use the extreme sterilization protocols recommended for prions, risk remains. Many people have been so exposed over the years, a worrying occurrence Americano científico editor Phil Yam wrote about just a few years ago.

Are Prions More Common Than We Realize?

The enduring infectious power of prions is unsettling all on its own, but some scientists are beginning to suspect something far scarier.

Aggregates of prions form amyloids. But amyloids also form from proteins called amyloid-beta, tau, and alpha-synuclein. You may recognize these names. The accumulation of these proteins in amyloids -- as plaques, tangles, and Lewy bodies -- are signature indications, and perhaps causes, of Alzheimer&rsquos and Parkinson&rsquos diseases. These amyloids, like prions, stick to surgical instruments &ldquolike glue&rdquo and survive standard sterilization procedures. They, too, are distressingly hard to "kill".

The only thing that keeps such amyloids from being considered prions is infectivity. But recently, at least one team of scientists found circumstantial, controversial -- and stomach-churning -- evidence that amyloids from patients with these diseases may be infective. What if Alzheimer&rsquos could be transmitted on surgical equipment? Prion diseases are rare. Alzheimer's and Parkinson's are not.

Given the horrifying implications, and in spite of the expense and effort, I think it's time for surgeons to start taking this possibility very seriously. If there's one thing prions have shown me, it's that you should nunca underestimate the capabilities of the most badass protein polymers on the planet.

Race, Brent, Katie Williams, Andrew G. Hughson, Casper Jansen, Piero Parchi, Annemieke JM Rozemuller, and Bruce Chesebro. "Familial human prion diseases associated with prion protein mutations Y226X and G131V are transmissible to transgenic mice expressing human prion protein." Acta neuropathologica communications 6, não. 1 (2018): 13.

As opiniões expressas são do (s) autor (es) e não necessariamente da Scientific American.

SOBRE OS AUTORES)

Jennifer Frazer, an AAAS Science Journalism Award–winning science writer, authored The Artful Amoeba blog for Americano científico. She has degrees in biology, plant pathology and science writing.


Potential to destroy viruses using prions? - Biologia

Prions are infectious particles that contain no nucleic acids, and viroids are small plant pathogens that do not encode proteins.

Objetivos de aprendizado

Describe prions and viroids and their basic properties

Principais vantagens

Pontos chave

  • The prion appears to be the first infectious agent found whose transmission is not reliant upon genes made of DNA or RNA.
  • An infectious structural variant of a normal cellular protein called PrP (prion protein) is known to cause spongiform encephalopathies.
  • Prions have been implicated in fatal neurodegenerative diseases, such as kuru in humans and bovine spongiform encephalopathy (BSE) in cattle.
  • Loss of motor control and unusual behaviors are common symptoms of individuals with kuru and BSE symptoms are usually followed by death.
  • Viroids do not have a capsid or outer envelope and can reproduce only within a host cell.
  • Viroids are not known to cause any human diseases, but they are responsible for crop failures and the loss of millions of dollars in agricultural revenue each year.

Termos chave

  • prion: a self-propagating misfolded conformer of a protein that is responsible for a number of diseases that affect the brain and other neural tissue
  • proteinaceous: of, pertaining to, or consisting of protein
  • viroid: plant pathogens that consist of just a short section of RNA, but without the protein coat typical of viruses

Prions

Prions, so-called because they are proteinaceous, are infectious particles, smaller than viruses, that contain no nucleic acids (neither DNA nor RNA). Historically, the idea of an infectious agent that did not use nucleic acids was considered impossible, but pioneering work by Nobel Prize-winning biologist Stanley Prusiner has convinced the majority of biologists that such agents do indeed exist.

Fatal neurodegenerative diseases, such as kuru in humans and bovine spongiform encephalopathy (BSE) in cattle (commonly known as “mad cow disease”), were shown to be transmitted by prions. The disease was spread by the consumption of meat, nervous tissue, or internal organs between members of the same species. Kuru, native to humans in Papua New Guinea, was spread from human to human via ritualistic cannibalism. BSE, originally detected in the United Kingdom, spread between cattle by the practice of including cattle nervous tissue in feed for other cattle. Individuals with kuru and BSE show symptoms of loss of motor control and unusual behaviors, such as uncontrolled bursts of laughter with kuru, followed by death. Kuru was controlled by inducing the population to abandon its ritualistic cannibalism.

On the other hand, BSE was initially thought to affect only cattle. Cattle that died of BSE had developed lesions or “holes” in the brain, causing the brain tissue to resemble a sponge. Later on in the outbreak, however, it was shown that a similar encephalopathy in humans known as variant Creutzfeldt-Jakob disease (CJD) could be acquired from eating beef from animals with BSE, sparking bans by various countries on the importation of British beef and causing considerable economic damage to the British beef industry. BSE still exists in various areas. Although a rare disease, individuals that acquire CJD are difficult to treat. The disease spreads from human to human by blood, so many countries have banned blood donation from regions associated with BSE.

The cause of spongiform encephalopathies, such as kuru and BSE, is an infectious structural variant of a normal cellular protein called PrP (prion protein). It is this variant that constitutes the prion particle. PrP exists in two forms: PrP c , the normal form of the protein, and PrP sc , the infectious form. Once introduced into the body, the PrP sc contained within the prion binds to PrP c and converts it to PrP sc . This leads to an exponential increase of the PrP sc protein, which aggregates. PrP sc is folded abnormally the resulting conformation (shape) is directly responsible for the lesions seen in the brains of infected cattle. Thus, although not without some detractors among scientists, the prion appears to be an entirely new form of infectious agent the first one found whose transmission is not reliant upon genes made of DNA or RNA.

Example of the formation of a prion: (a) Endogenous normal prion protein (PrPc) is converted into the disease-causing form (PrPsc) when it encounters this variant form of the protein. PrPsc may arise spontaneously in brain tissue, especially if a mutant form of the protein is present, or it may occur via the spread of misfolded prions consumed in food into brain tissue. (b) This prion-infected brain tissue, visualized using light microscopy, shows the vacuoles that give it a spongy texture, typical of transmissible spongiform encephalopathies.

Viroids

Viroids are plant pathogens: small, single-stranded, circular RNA particles that are much simpler than a virus. They do not have a capsid or outer envelope, but, as with viruses, can reproduce only within a host cell. Viroids do not, however, manufacture any proteins. They produce only a single, specific RNA molecule. Human diseases caused by viroids have yet to be identified.

Viroid-infected plants are responsible for crop failures and the loss of millions of dollars in agricultural revenue each year. Some of the plants they infect include potatoes, cucumbers, tomatoes, chrysanthemums, avocados, and coconut palms.

Potatoes infected by a viroid: These potatoes have been infected by the potato spindle tuber viroid (PSTV). It is typically spread when infected knives are used to cut healthy potatoes, which are then planted.


Deadly Prion Brain Diseases & Experimental mRNA Jabs

An important and highly concerning study published early this year in the journal Microbiology & Infectious Diseases titled, “Covid-19 RNA Based Vaccines and the Risk of Prion Diseases,” addresses one of the many potential, unintended, adverse health effects of the experimental mRNA Covid-19 vaccines presently being deployed worldwide, namely, their possible induction of prion diseases, a category of highly fatal brain disorders.

The study abstract, well worth reading, summarizes both the context, intention, and results of the investigation:

Development of new vaccine technology has been plagued with problems in the past. The current RNA based SARSCoV-2 vaccines were approved in the US using an emergency order without extensive long term safety testing. In this paper the Pfizer COVID-19 vaccine was evaluated for the potential to induce prion-based disease in vaccine recipients.

The RNA sequence of the vaccine as well as the spike protein target interaction were analyzed for the potential to convert intracellular RNA binding proteins TAR DNA binding protein (TDP-43) and Fused in Sarcoma (FUS) into their pathologic prion conformations. The results indicate that the vaccine RNA has specific sequences that may induce TDP-43 and FUS to fold into their pathologic prion confirmations.

In the current analysis a total of sixteen UG tandem repeats (ΨGΨG) were identified and additional UG (ΨG) rich sequences were identified. Two GGΨA sequences were found. Potential G Quadruplex sequences are possibly present but a more sophisticated computer program is needed to verify these. Furthermore, the spike protein, created by the translation of the vaccine RNA, binds angiotensin converting enzyme 2 (ACE2), a zinc containing enzyme.

This interaction has the potential to increase intracellular zinc. Zinc ions have been shown to cause the transformation of TDP-43 to its pathologic prion configuration. The folding of TDP-43 and FUS into their pathologic prion confirmations is known to cause ALS, front temporal lobar degeneration, Alzheimer’s disease and other neurological degenerative diseases.

The enclosed finding as well as additional potential risks leads the author to believe that regulatory approval of the RNA based vaccines for SARS-CoV-2 was premature and that the vaccine may cause much more harm than benefit. [emphasis added]

As you can see above, the author is clearly concerned about the fact that the novel mRNA-based Covid-19 vaccines presently being deployed to hundreds of millions within the US, and around the world, have both been plagued by problems in the past, and are presently being allowed to bypass proper safety and efficacy testing normally required for FDA approval, through an Emergency Use Authorization enacted on Feb 4th, 2020, which indemnifed manufacturers from liability, and which was made possible through the declaration of national health emergency (now known to be based on faulty disease modeling, Covid death statistics, and faulty PCR-based Covid case numbers) and the emergency medical powers invoked, thereof.

Images of Creutzfeldt-Jakob disease

The research, therefore, sought to evaluate and identify the possibility that one of the unintended, adverse effects of the vaccines (specifically, the Pfizer vaccine) may be that either the synthetic nucleoside-mRNA sequence chosen for these vaccines or the spike protein target interaction following their administration may result in the pathological misfolding of proteins normally present in cells, transforming them into what are known as prions — which can lead to rapid and highly lethal brain degeneration related disorders. [To learn more about prion diseases, you can get a summary at the PrionAlliance.com website]

The research uncovered that, indeed, a plausible mechanism for mRNA Covid-19-induced prion formation exists, namely, “the folding of TDP-43 and FUS into their pathologic prion confirmations is known to cause ALS, front temporal lobar degeneration, Alzheimer’s disease and other neurological degenerative diseases.

The study points that previous research has been done that indicates there is a link between COVID-19 vaccines and prion disease:

Finally, others working in the field have published additional support that COVID-19 vaccines could potentially induce prion disease. Authors [18] found prion related sequences in the COVID-19 spike protein which were not found in related coronaviruses. Others [19] have reported a case of prion disease, Creutzfeldt-Jakob disease, initially occurring in a man with COVID-19.” [emphasis added]

The author also states in the introduction that concerns about long-term adverse health effects of vaccines are not new, even when vaccines have been approved through normal, long-term trials (

10-15 years) and have passed regulatory approval by the FDA:

Vaccines have been found to cause a host of chronic, late developing adverse events. Some adverse events like type 1 diabetes may not occur until 3-4 years after a vaccine is administered [1]. In the example of type 1 diabetes the frequency of cases of adverse events may surpass the frequency of cases of severe infectious disease the vaccine was designed to prevent. Given that type 1 diabetes is only one of many immune mediated diseases potentially caused by vaccines, chronic late occurring adverse events are a serious public health issue.”

The advent of new vaccine technology creates new potential mechanisms of vaccine adverse events. For example, the first killed polio vaccine actually caused polio in recipients because the up scaled manufacturing process did not effectively kill the polio virus before it was injected into patients. RNA based vaccines offers special risks of inducing specific adverse events.

One such potential adverse event is prion based diseases caused by activation of intrinsic proteins to form prions. A wealth of knowledge has been published on a class of RNA binding proteins shown to participating in causing a number of neurological diseases including Alzheimer’s disease and ALS. TDP-43 and FUS are among the best studied of these proteins [2].

The Pfizer RNA based COVID-19 vaccine was approved by the US FDA under an emergency use authorization without long term safety data. Because of concerns about the safety of this vaccine a study was performed to determine if the vaccine could potentially induce prion based disease.” [emphasis added]

In the discussion portion of the study, another important factor is addressed, namely, the possibility that there has been misuse of RNA research (funded by the Bill and Melinda Gates Foundation and Ellison Medical Foundation), and that disease causing prions could be considered bioweapons:

There is an old saying in medicine that “the cure may be worse than the disease.” The phrase can be applied to vaccines. In the current paper the concern is raised that the RNA based COVID vaccines have the potential to cause more disease than the epidemic of COVID-19. This paper focuses on a novel potential adverse event mechanism causing prion disease which could be even more common and debilitating than the viral infection the vaccine is designed to prevent. While this paper focuses on one potential adverse event there are multiple other potential fatal adverse events as discussed below. Over the last two decades there has been a concern among certain scientists that prions could be used as bioweapons. More recently there has been a concern that ubiquitous intracellular molecules could be activated to cause prion disease including Alzheimer’s disease, ALS and other neurodegenerative diseases. This concern originates due to potential for misuse of research data on the mechanisms by which certain RNA binding proteins like TDP-43, FUS and others can be activated to form disease causing prions. The fact that this research, which could be used for bioweapons development, is funded by private organizations including the Bill and Melinda Gates Foundation, and Ellison Medical Foundation [2] without national/international oversight is also a concern. In the past, for example, there were prohibitions for publishing information pertaining to construction of nuclear bombs.” [emphasis added]

Another salient and concerning point is made that should be discussed further:

Data is not publicly available to provide information on how long the vaccine RNA is translated in the vaccine recipient and how long after translation the spike protein will be present in the recipient’s cells. [emphasis added]

While the promotional copy and superficial explanations provided the public by both the manufacturers of the mRNA Covid-19 vaccines and their would-be regulatory agencies in government, who describe the vaccines as unequivocally safe, despite the existence of over 118,000 adverse events reports on the government’s Vaccine Adverse Event Reporting System (VAERS) database as of May 6th, 2021, the reality is that these vaccines genetically modifiy a portion of the recipient body’s cells into vaccine antigen (“spike protein”) producing bio-factories — something never done before in the world history of vaccination campaigns.

Nowhere is there evidence presented (based on multi-year human research) that this process will occur safely, nor for how long the effects will last, and what the possible adverse effects are to both the vaccinated and those exposed to them as bystanders and who might experience the horizontal transfer of vaccine-induced antigens/antibodies via exosome- or “microvessicle shedding”-mediated processes (learn more about this here: Ways mRNA Covid-19 Vaccines Could Harm the Unvaccinated Explored In Depth).

Nor is their a discussion of how these changes in the physiology and genetic makeup of those affected might be passed down to their progeny, which is now an established possibility given the publication of the following study: “Soma-to-Germline Transmission of RNA in Mice Xenografted with Human Tumour Cells: Possible Transport by Exosomes, and which I have previously reported on extensively here.

The study also raises concerns about the mRNA vaccines possibly inducing autoimmune diseases:

Autoimmunity and the opposing condition, metabolic syndrome, are well know adverse events caused by vaccines [14]. COVID-19 infections are associated with the induction of autoantibodies and autoimmune disease [15,16] making it more than plausible a vaccine could do the same. One author has found amino acid sequences coded by the spike protein to be identical to sequences in human proteins including proteins found in the CNS [17]. Autoimmunity can also be induced by epitope spreading when a foreign antigen, like the spike protein, is presented by an antigen presenting cell that also has self molecules attached to its MHC molecules.” [emphasis added]

The study concludes with a stern warning:

Approving a vaccine, utilizing novel RNA technology without extensive testing is extremely dangerous. The vaccine could be a bioweapon and even more dangerous than the original infection. [emphasis added]

It takes courage, as a researcher, to address and publish on topics like these. Especially, in this time of the near universal centralization and weaponization of the international media against open discussion of the true risks of the mRNA Covid-19 vaccines — or any vaccines for that matter. As Orwell once said, “in times of universal deceit, telling the truth is a revolutionary act.” No doubt, this researcher, and this paper, will be attacked, and “fact checked and debunked,” and tossed in the growing bin of so-called “conspiracy theories.

Retractions are another form of censorship growing increasingly frequent in the space of scientific research that challenges the dominant narrative, regardless of whether the science is accurate. That said, there is a growing movement of millions upon millions, around the world, who understand the agenda that is being pushed with experimental vaccines and other pharmceutical products is dangerous, violates basic medical ethical principles established after the Nuremberg trials (1947) against human medical experimentation without full informed consent, and must be countered with strong, evidence-based, peaceful dissent and constructive action.

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Deadly Prion Brain Diseases and Experimental mRNA Covid-19 Vaccines: Study Finds Plausible Link

An important and highly concerning study published early this year in the journal Microbiology & Infectious Diseases titled, “Covid-19 RNA Based Vaccines and the Risk of Prion Diseases,” addresses one of the many potential, unintended, adverse health effects of the experimental mRNA Covid-19 vaccines presently being deployed worldwide, namely, their possible induction of prion diseases, a category of highly fatal brain disorders.

The study abstract, well worth reading, summarizes both the context, intention, and results of the investigation:

Development of new vaccine technology has been plagued with problems in the past. The current RNA based SARSCoV-2 vaccines were approved in the US using an emergency order without extensive long term safety testing. In this paper the Pfizer COVID-19 vaccine was evaluated for the potential to induce prion-based disease in vaccine recipients. The RNA sequence of the vaccine as well as the spike protein target interaction were analyzed for the potential to convert intracellular RNA binding proteins TAR DNA binding protein (TDP-43) and Fused in Sarcoma (FUS) into their pathologic prion conformations. The results indicate that the vaccine RNA has specific sequences that may induce TDP-43 and FUS to fold into their pathologic prion confirmations. In the current analysis a total of sixteen UG tandem repeats (ΨGΨG) were identified and additional UG (ΨG) rich sequences were identified. Two GGΨA sequences were found. Potential G Quadruplex sequences are possibly present but a more sophisticated computer program is needed to verify these. Furthermore, the spike protein, created by the translation of the vaccine RNA, binds angiotensin converting enzyme 2 (ACE2), a zinc containing enzyme. This interaction has the potential to increase intracellular zinc. Zinc ions have been shown to cause the transformation of TDP-43 to its pathologic prion configuration. The folding of TDP-43 and FUS into their pathologic prion confirmations is known to cause ALS, front temporal lobar degeneration, Alzheimer’s disease and other neurological degenerative diseases. The enclosed finding as well as additional potential risks leads the author to believe that regulatory approval of the RNA based vaccines for SARS-CoV-2 was premature and that the vaccine may cause much more harm than benefit. ” –J. Bart Classen, MD. 2021 5(1): 1-3. Journal of Microbiology & Infectious Diseases.

As you can see above, the author is clearly concerned about the fact that the novel mRNA-based Covid-19 vaccines presently being deployed to hundreds of millions within the US, and around the world, have both been plagued by problems in the past, and are presently being allowed to bypass proper safety and efficacy testing normally required for FDA approval, through an Emergency Use Authorization enacted on Feb 4th, 2020, which indemnifed manufacturers from liability, and which was made possible through the declaration of national health emergency (now known to be based on faulty disease modeling, Covid death statistics, and faulty PCR-based Covid case numbers) and the emergency medical powers invoked, thereof.


Creutzfeldt–Jakob disease (CJD), also known as neurocognitive disorder or subacute spongiform encephalopathy is due to prion disease, a rapidly progressing and highly fatal degenerative brain disorder

The research, therefore, sought to evaluate and identify the possibility that one of the unintended, adverse effects of the vaccines (specifically, the Pfizer vaccine) may be that either the synthetic nucleoside-mRNA sequence chosen for these vaccines or the spike protein target interaction following their administration may result in the pathological misfolding of proteins normally present in cells, transforming them into what are known as prions — which can lead to rapid and highly lethal brain degeneration related disorders. [To learn more about prion diseases, you can get a summary at the PrionAlliance.com website]

The research uncovered that, indeed, a plausible mechanism for mRNA Covid-19-induced prion formation exists, namely, “the folding of TDP-43 and FUS into their pathologic prion confirmations is known to cause ALS, front temporal lobar degeneration, Alzheimer’s disease and other neurological degenerative diseases.”

The study points that previous research has been done that indicates there is a link between COVID-19 vaccines and prion disease:

Finally, others working in the field have published additional support that COVID-19 vaccines could potentially induce prion disease. Authors [18] found prion related sequences in the COVID-19 spike protein which were not found in related coronaviruses. Others [19] have reported a case of prion disease, Creutzfeldt-Jakob disease, initially occurring in a man with COVID-19.”

The author also states in the introduction that concerns about long-term adverse health effects of vaccines are not new, even when vaccines have been approved through normal, long-term trials (

10-15 years) and have passed regulatory approval by the FDA:

Vaccines have been found to cause a host of chronic, late developing adverse events. Some adverse events like type 1 diabetes may not occur until 3-4 years after a vaccine is administered [1]. In the example of type 1 diabetes the frequency of cases of adverse events may surpass the frequency of cases of severe infectious disease the vaccine was designed to prevent. Given that type 1 diabetes is only one of many immune mediated diseases potentially caused by vaccines, chronic late occurring adverse events are a serious public health issue.”

The advent of new vaccine technology creates new potential mechanisms of vaccine adverse events. For example, the first killed polio vaccine actually caused polio in recipients because the up scaled manufacturing process did not effectively kill the polio virus before it was injected into patients. RNA based vaccines offers special risks of inducing specific adverse events.

One such potential adverse event is prion based diseases caused by activation of intrinsic proteins to form prions. A wealth of knowledge has been published on a class of RNA binding proteins shown to participating in causing a number of neurological diseases including Alzheimer’s disease and ALS. TDP-43 and FUS are among the best studied of these proteins [2].

The Pfizer RNA based COVID-19 vaccine was approved by the US FDA under an emergency use authorization without long term safety data. Because of concerns about the safety of this vaccine a study was performed to determine if the vaccine could potentially induce prion based disease.

In the discussion portion of the study, another important factor is addressed, namely, the possibility that there has been misuse of RNA research (funded by the Bill and Melinda Gates Foundation and Ellison Medical Foundation), and that disease causing prions could be considered bioweapons:

There is an old saying in medicine that “the cure may be worse than the disease.” The phrase can be applied to vaccines. In the current paper the concern is raised that the RNA based COVID vaccines have the potential to cause more disease than the epidemic of COVID-19. This paper focuses on a novel potential adverse event mechanism causing prion disease which could be even more common and debilitating than the viral infection the vaccine is designed to prevent. While this paper focuses on one potential adverse event there are multiple other potential fatal adverse events as discussed below. Over the last two decades there has been a concern among certain scientists that prions could be used as bioweapons. More recently there has been a concern that ubiquitous intracellular molecules could be activated to cause prion disease including Alzheimer’s disease, ALS and other neurodegenerative diseases. This concern originates due to potential for misuse of research data on the mechanisms by which certain RNA binding proteins like TDP-43, FUS and others can be activated to form disease causing prions. The fact that this research, which could be used for bioweapons development, is funded by private organizations including the Bill and Melinda Gates Foundation, and Ellison Medical Foundation [2] without national/international oversight is also a concern. In the past, for example, there were prohibitions for publishing information pertaining to construction of nuclear bombs.

Another salient and concerning point is made that should be discussed further:

“Data is not publicly available to provide information on how long the vaccine RNA is translated in the vaccine recipient and how long after translation the spike protein will be present in the recipient’s cells.”

While the promotional copy and superficial explanations provided the public by both the manufacturers of the mRNA Covid-19 vaccines and their would-be regulatory agencies in government, who describe the vaccines as unequivocally safe, despite the existence of over 118,000 adverse events reports on the government’s Vaccine Adverse Event Reporting System (VAERS) database as of May 6th, 2021, the reality is that these vaccines genetically modifiy a portion of the recipient body’s cells into vaccine antigen (“spike protein”) producing bio-factories — something never done before in the world history of vaccination campaigns.

Nowhere is there evidence presented (based on multi-year human research) that this process will occur safely, nor for how long the effects will last, and what the possible adverse effects are to both the vaccinated and those exposed to them as bystanders and who might experience the horizontal transfer of vaccine-induced antigens/antibodies via exosome- or “microvessicle shedding”-mediated processes (learn more about this here: Ways mRNA Covid-19 Vaccines Could Harm the Unvaccinated Explored In Depth) Nor is their a discussion of how these changes in the physiology and genetic makeup of those affected might be passed down to their progeny, which is now an established possibility given the publication of the following study: “Soma-to-Germline Transmission of RNA in Mice Xenografted with Human Tumour Cells: Possible Transport by Exosomes, and which I have previously reported on extensively here.

The study also raises concerns about the mRNA vaccines possibly inducing autoimmune diseases:

Autoimmunity and the opposing condition, metabolic syndrome, are well know adverse events caused by vaccines [14]. COVID-19 infections are associated with the induction of autoantibodies and autoimmune disease [15,16] making it more than plausible a vaccine could do the same. One author has found amino acid sequences coded by the spike protein to be identical to sequences in human proteins including proteins found in the CNS [17]. Autoimmunity can also be induced by epitope spreading when a foreign antigen, like the spike protein, is presented by an antigen presenting cell that also has self molecules attached to its MHC molecules.”

The study concludes with a stern warning:

“Approving a vaccine, utilizing novel RNA technology without extensive testing is extremely dangerous. The vaccine could be a bioweapon and even more dangerous than the original infection.”

It takes courage, as a researcher, to address and publish on topics like these. Especially, in this time of the near universal centralization and weaponization of the international media against open discussion of the true risks of the mRNA Covid-19 vaccines — or any vaccines for that matter. As Orwell once said, “in times of universal deceit, telling the truth is a revolutionary act.” No doubt, this researcher, and this paper, will be attacked, and “fact checked and debunked,” and tossed in the growing bin of so-called “conspiracy theories.” Retractions are another form of censorship growing increasingly frequent in the space of scientific research that challenges the dominant narrative, regardless of whether the science is accurate. That said, there is a growing movement of millions upon millions, around the world, who understand the agenda that is being pushed with experimental vaccines and other pharmceutical products is dangerous, violates basic medical ethical principles established after the Nuremberg trials (1947) against human medical experimentation without full informed consent, and must be countered with strong, evidence-based, peaceful dissent and constructive action


Assista o vídeo: Vírus E Príons. Prof. Rômulo Nunes (Novembro 2021).