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Unidade 26: Exame Bacteriano de Água - Teste de Tubos Múltiplos, Contagem de Placa Padrão e Técnica de Filtro de Membrana - Biologia


Unidade 26: Exame Bacteriano de Água - Teste de Tubos Múltiplos, Contagem de Placa Padrão e Técnica de Filtro de Membrana

Guia de conformidade para pequenas entidades: água engarrafada e coliformes totais e E. coli março de 2010

Esta orientação representa o pensamento atual da Food and Drug Administration (FDA) sobre este tópico. Ele não cria ou confere quaisquer direitos para qualquer pessoa e não opera para vincular a FDA ou o público. Você pode usar uma abordagem alternativa se a abordagem satisfizer os requisitos dos estatutos e regulamentos aplicáveis.

I. Introdução

Em 29 de maio de 2009, a FDA publicou uma regra final (74 FR 25651) que alterou seu padrão de água engarrafada de regulamentos de qualidade (21 CFR parte 165) revisando a disposição para qualidade microbiológica para exigir que se Escherichia coli (E. coli) está presente na água engarrafada, então a água engarrafada será considerada adulterada. A FDA também alterou seus regulamentos atuais de boas práticas de fabricação (CGMP) para o processamento e engarrafamento de água potável engarrafada (21 CFR parte 129) (o regulamento CGMP de água engarrafada) para (1) estabelecer que a água de origem contendo E. coli não será considerada para ter uma qualidade sanitária segura e será proibido de uso na produção de água engarrafada (2) revisar os requisitos de testes microbiológicos para produtos de água engarrafada acabados e para água de fonte diferente de um sistema de água público (PWS) e (3 ) introduzir novos requisitos para medidas corretivas e manutenção de registros. Sob esses novos requisitos, os fabricantes de água engarrafada (engarrafadores) que obtêm sua fonte de água de outra fonte que não um PWS devem testar sua fonte de água pelo menos semanalmente para coliformes totais. Se algum organismo coliforme for detectado na fonte de água, os engarrafadores devem realizar testes de acompanhamento para determinar se algum dos organismos coliformes são E. coli. Antes que os engarrafadores possam usar água de uma fonte que deu positivo para E. coli, eles devem tomar as medidas adequadas para retificar ou eliminar a causa de E. coli contaminação dessa fonte e manter registros de tais ações. Além disso, se quaisquer organismos coliformes forem detectados no teste semanal de coliformes totais de produtos de água engarrafados acabados, os engarrafadores são obrigados a realizar testes de acompanhamento para determinar se algum dos organismos coliformes são E. coli. A data de vigência da regra final é 1º de dezembro de 2009.

O FDA preparou este Guia de conformidade para pequenas entidades de acordo com a seção 212 do Small Business Regulatory Enforcement Fairness Act (Lei Pública 104-121). Este documento de orientação reafirma em linguagem simples os requisitos legais da regra final de 29 de maio de 2009 estabelecida em 21 CFR 129 e 165 sobre os contaminantes coliformes totais e E. coli. Esses regulamentos são vinculativos e têm pleno vigor e efeito da lei.

Os documentos de orientação da FDA, incluindo esta orientação, não estabelecem responsabilidades legalmente executáveis. Em vez disso, as orientações descrevem o pensamento atual da Agência sobre um tópico e devem ser vistas apenas como recomendações, a menos que requisitos regulamentares ou estatutários específicos sejam citados. O uso da palavra deveria nas orientações da Agência significa que algo é sugerido ou recomendado, mas não obrigatório.

II. Fundo

De acordo com a seção 410 (b) (1) da Lei Federal de Alimentos, Medicamentos e Cosméticos (a Lei FD e ampC), no máximo 180 dias antes da data de vigência de um Regulamento Nacional de Água Potável Primário emitido pela Agência de Proteção Ambiental (EPA) para um contaminante sob a seção 1412 da Lei de Água Potável Segura, a FDA é obrigada a emitir um padrão de regulamento de qualidade para esse contaminante em água engarrafada ou fazer uma conclusão de que tal regulamento não é necessário para proteger a saúde pública porque o contaminante está contido em água em PWSs, mas não em água usada para água engarrafada. Além disso, a seção 410 (b) (3) da Lei FD & ampC exige que o padrão de qualidade para um contaminante em água engarrafada não seja menos rigoroso do que o nível máximo de contaminante da EPA e não menos protetor da saúde pública do que os requisitos de técnica de tratamento da EPA para o mesmo contaminante.

No Federal Register de 8 de novembro de 2006 (71 FR 65574), a EPA publicou a Ground Water Rule (GWR) para fornecer proteção aumentada contra patógenos microbianos fecais em PWSs que usam fontes de água subterrânea (também conhecido como sistemas de água subterrânea ( GWSs)). A EPA estabeleceu técnicas de tratamento destinadas a identificar e direcionar GWSs que são suscetíveis à contaminação fecal e exigem que tais GWSs monitorem e, quando necessário, tomem ações corretivas para prevenir ou remover tal contaminação. Na regra, a EPA identificou E. coli como indicador de contaminação fecal. A EPA também identificou a ação corretiva apropriada, monitoramento de conformidade e requisitos de notificação pública. A EPA emitiu o GWR para proteger a saúde pública porque alguns GWSs podem correr o risco de fornecer água que contém patógenos microbianos prejudiciais de contaminação fecal. A ingestão de água contaminada pode resultar em doenças gastrointestinais leves e autolimitadas ou doenças mais graves e potencialmente fatais.

Em resposta a esta regulamentação da EPA, a FDA publicou a regra final de 29 de maio de 2009. Esta regra final garante que os padrões do FDA para a qualidade mínima da água engarrafada, conforme afetados pela contaminação fecal, não serão menos protetores da saúde pública do que aqueles definidos pela EPA para a água potável pública.

III. Perguntas e respostas

  1. Quais testes microbiológicos devem ser realizados na fonte de água obtida de outro que não um PWS?


Determinando a potabilidade da água | Microbiologia da Água

A técnica de teste de coliformes (ou MTFT) é um método padrão seguido em todo o mundo para determinar se a água é potável ou contaminada por fezes. A técnica envolve três etapas sucessivas, a saber, teste presuntivo, teste confirmado e teste concluído.

No teste presuntivo, tubos de caldo de lactose são inoculados com três volumes de água diferentes para dar uma estimativa do número mais provável (NMP) de formas de coli na água.

Os tubos que são positivos para a produção de gás são inoculados em caldo de bile de lactose verde brilhante no teste confirmado e os tubos positivos são usados ​​para calcular o valor do número mais provável (NMP). A presença de bactérias coliformes em amostras de água é estabelecida em testes concluídos. Um esquema geral da técnica do teste de coliformes é apresentado na Fig. 31.2.

2. Técnica de filtro de membrana:

Essa técnica usada para o exame bacteriológico da água para determinar sua potabilidade foi desenvolvida na Alemanha durante a Segunda Guerra Mundial e, atualmente, é considerada vantajosa sobre a técnica do teste de coliformes por causa de suas vantagens significativas.

Nesta técnica, um disco de filtro de membrana fina é usado. O disco-filtro é composto por derivados de celulose e pode reter em sua superfície todas as bactérias da amostra de água. A água é filtrada através do disco-filtro e o disco é então transferido com uma pinça estéril para uma almofada absorvente fina que foi previamente saturada com o meio apropriado (geralmente meio Endo-caldo [GM-9]) e acomodado dentro de um Petri prato.

A placa de Petri contendo almofada absorvente e disco de filtro é incubada a 37 ° C por 18-24 horas. O meio se difunde através dos poros do disco-filtro e fornece nutrientes para as bactérias. Após o término da incubação, pode-se ver o desenvolvimento de colônias no disco-filtro. As colônias características de diferentes bactérias agora podem ser estudadas para determinar a potabilidade da água.

(i) Um grande volume de água pode ser analisado em um curto período de tempo sem grandes despesas.

(ii) O disco-filtro de membrana pode ser transferido de um meio para outro para diferenciar organismos.

(iii) As estimativas quantitativas de certos tipos de bactérias, por exemplo, coliformes, podem ser feitas usando meios seletivos apropriados, mesmo quando os tipos de bactérias em questão estão presentes em pequenos números.

(iv) Esta técnica requer muito menos equipamentos e, portanto, pode ser operada diretamente no campo.

(i) Volume do limite de águas de alta turbidez amostrado.

(ii) A alta população de bactérias de fundo resulta em crescimento excessivo.

(iii) Metais e compostos fenólicos podem ser absorvidos pelos filtros e inibir o crescimento.


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