Em formação

Diagnóstico de infecção cutânea por S. pyogenes


S. pyogenes é uma bactéria "comedora de carne". É o resultado da destruição da vida mionecrose causado por este organismo. S. pyogenes evita a fagocitose (mediada principalmente por cápsula, proteínas M e semelhantes a M, C5a peptidase), aderir e invadir células hospedeiras (proteína M, lipoteicóica, proteína F) e produzir toxinas (exotoxinas pirogênicas estreptocócicas, esteatolisina S, estreptolsina O, estreptoquinase , DNases).

Doenças supurativas: faringite, infecções dos tecidos moles.

Erisipela: infecção cutânea localizada com dor, inflamação, aumento dos linfonodos e sintomas sistêmicos.

Celulite: infecção da pele que envolve o tecido subcutâneo.

Fasceíte Necrosante: infecção profunda da pele que envolve a destruição das camadas musculares e de gordura.

Acho que essas são as infecções de pele. Mas e quanto ao seu diagnóstico?

Acho que fazer biópsia de tecido vivo, não de necrótico. Se pus, provavelmente por causa dele. Acho que podemos fazer a coloração de Gram, reconhecer cocos Gram-positivos como em um barbante. Então, podemos fazer o teste de peróxido de hidrogênio - se não houver bolhas, então a suspeita de S. pyogenes, uma vez que catalase negativa. O teste de optoquina, que é positivo para S. pyogenes.

Qual é o procedimento correto para fazer o diagnóstico de infecção de pele para estreptococos do grupo A?


S. pyogenes cultivadas em Blood Agar devem mostrar beta-hemólise. Colônias B-hemolíticas podem ser posteriormente identificadas como S. pyogenes pelos resultados do teste de catalase (peróxido de hidrogênio) negativo, reação de L-pirrolidonilarilamidase (PYR) positiva (1) e sensibilidade à bacitracina (2). Consulte https://www.inkling.com/read/medical-microbiology-murray-rosenthal-pfaller-7th/chapter-19/streptococcus-pyogenes

O PCR também pode ser usado: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0923250805000215


Streptococcus pyogenes

Streptococcus pyogenes , também conhecido como estreptococo do grupo A (GAS), está mais comumente associado a infecções leves e autorresolventes da pele e orofaringe. No entanto, a disseminação da bactéria para locais normalmente estéreis dentro do corpo pode levar a uma variedade de condições invasivas que estão associadas a alta morbidade e mortalidade. Além disso, a geração de anticorpos humanos com reatividade cruzada em resposta à infecção prolongada de GAS pode resultar no desenvolvimento de sequelas auto-imunes pós-estreptocócicas que afetam os órgãos, articulações e o SNC.

A patogênese do GAS é mediada por um extenso repertório de fatores de virulência extracelulares. A colonização inicial da pele e orofaringe é facilitada por adesinas associadas a células que se ligam a vários componentes da matriz extracelular do hospedeiro. Enquanto uma bateria de moléculas antifagocíticas permite que o organismo persista no local inicial da infecção, a produção de múltiplos fatores de virulência toxigênicos e destrutivos do tecido facilita a transição de um fenótipo de doença superficial para um invasivo.

Apesar da suscetibilidade contínua do GAS aos antibióticos β-lactâmicos, um ressurgimento de doenças estreptocócicas graves foi observado nos últimos 30 anos. Embora a causa desse ressurgimento não seja completamente compreendida, ela foi provisoriamente atribuída ao reaparecimento e / ou aumento da circulação de um clone altamente invasivo do sorotipo M1T1 GAS. Essa mudança na epidemiologia da infecção por GAS destaca a necessidade de maior vigilância de GAS na comunidade, testes diagnósticos mais rápidos e confiáveis ​​para infecção por GAS em um ambiente clínico e tratamentos mais direcionados da doença invasiva por GAS. Acima de tudo, o desenvolvimento de uma vacina GAS segura e eficaz seria inestimável.


Cistite

A cistite é mais frequentemente causada por uma infecção bacteriana da bexiga, mas também pode ocorrer como uma reação a certos tratamentos ou irritantes, como radioterapia, sprays de higiene ou espermicidas. Os sintomas comuns de cistite incluem disúria (micção acompanhada de queimação, desconforto ou dor), piúria (pus na urina), hematúria (sangue na urina) e dor na bexiga.

Nas mulheres, as infecções da bexiga são mais comuns porque a uretra é curta e localizada bem próxima ao ânus, o que pode resultar em infecções do trato urinário por bactérias fecais. As infecções da bexiga também são mais comuns em idosos porque a bexiga pode não esvaziar completamente, fazendo com que a urina se acumule. Os idosos também podem ter sistemas imunológicos mais fracos que os tornam mais vulneráveis ​​a infecções. Condições como prostatite em homens ou pedras nos rins em homens e mulheres podem afetar a drenagem adequada da urina e aumentar o risco de infecções da bexiga. A cateterização também pode aumentar o risco de infecção da bexiga (ver Caso em questão: Cistite em idosos).

Bactérias Gram-negativas, como Escherichia coli (mais comumente), Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, e Klebsiella pneumoniae causa a maioria das infecções da bexiga. Patógenos Gram-positivos associados à cistite incluem o coagulase-negativo Staphylococcus saprophyticus, Enterococcus faecalis, e Streptococcus agalactiae. A urinálise manual de rotina usando uma tira reagente de urina ou tira de teste pode ser usada para uma rápida triagem de infecção. Essas tiras de teste (Figura ( PageIndex <1> )) são mantidas em um jato de urina ou mergulhadas em uma amostra de urina para testar a presença de nitritos, esterase leucocitária, proteína ou sangue que podem indicar uma bactéria ativa infecção. A presença de nitrito pode indicar a presença de E. coli ou K. pneumonia essas bactérias produzem nitrato redutase, que converte nitrato em nitrito. O teste da esterase leucocitária (LE) detecta a presença de neutrófilos como uma indicação de infecção ativa.

A baixa especificidade, sensibilidade ou ambas, associadas a esses testes de rastreamento rápido, requerem cuidado na interpretação dos resultados e no seu uso no diagnóstico de infecções do trato urinário. Portanto, resultados positivos de LE ou nitrito são seguidos por uma cultura de urina para confirmar uma infecção da bexiga. A cultura de urina geralmente é realizada usando ágar sangue e ágar MacConkey, e é importante fazer uma cultura de urina limpa para minimizar a contaminação com a microbiota normal do pênis e da vagina. Uma coleta limpa de urina é realizada lavando primeiro os lábios e a abertura uretral de pacientes do sexo feminino ou o pênis dos pacientes do sexo masculino. O paciente então libera uma pequena quantidade de urina no vaso sanitário antes de interromper o fluxo de urina. Finalmente, o paciente volta a urinar, desta vez enchendo o recipiente usado para coletar a amostra.

A cistite bacteriana é comumente tratada com fluoroquinolonas, nitrofurantoína, cefalosporinas ou uma combinação de trimetoprima e sulfametoxazol. Os medicamentos para a dor podem fornecer alívio para pacientes com disúria. O tratamento é mais difícil em pacientes idosos, que apresentam uma taxa maior de complicações, como sepse e infecções renais.

Figura ( PageIndex <1> ): uma vareta medidora de urina é comparada com uma chave colorida para determinar os níveis de vários produtos químicos, proteínas ou células na urina. Níveis anormais podem indicar uma infecção. (crédito: modificação do trabalho por Suzanne Wakim)

caso em questão - CISTITE EM IDOSOS

Robert, um viúvo de 81 anos com Alzheimer & rsquos de início precoce, foi recentemente transferido para uma casa de repouso porque estava tendo dificuldade em viver sozinho. Poucas semanas após sua chegada, ele desenvolveu febre e começou a sentir dor associada à micção. Ele também começou a ter episódios de confusão e delírio. O médico designado para examinar Robert leu seu arquivo e notou que Robert fora tratado para prostatite vários anos antes. Quando perguntou a Robert com que frequência tinha urinado, Robert explicou que vinha tentando não beber muito, de modo que não precisava andar até o banheiro.

Todas essas evidências sugerem que Robert provavelmente tem uma infecção do trato urinário. A idade de Robert & rsquos significa que seu sistema imunológico provavelmente começou a enfraquecer, e sua condição anterior de próstata pode estar dificultando o esvaziamento da bexiga. Além disso, a abstenção de líquidos por Robert & rsquos levou à desidratação e micção infrequente, o que pode ter permitido que uma infecção se instalasse em seu trato urinário. A febre e a disúria são sinais comuns de uma ITU em pacientes de todas as idades, e as ITU em pacientes idosos costumam ser acompanhadas por um declínio notável na função mental.

Desafios físicos muitas vezes desencorajam os idosos a urinar com a mesma frequência com que fariam de outra forma. Além disso, as condições neurológicas que afetam desproporcionalmente os idosos (por exemplo, Alzheimer & rsquos e doença de Parkinson & rsquos) também podem reduzir sua capacidade de esvaziar a bexiga. O médico de Robert & rsquos observou que ele estava tendo dificuldade para navegar em sua nova casa e recomendou que recebesse mais assistência e que sua ingestão de líquidos fosse monitorada. O médico também colheu uma amostra de urina e solicitou uma cultura de laboratório para confirmar a identidade do agente causador.

  1. Por que é importante identificar o agente causador de uma ITU?
  2. O médico deve prescrever um antibiótico de amplo ou estreito espectro para tratar a ITU de Robert & rsquos? Porque?

O rompimento da barreira cutânea, como a presença de úlceras, feridas ou infecções fúngicas da pele (por exemplo, pé de atleta e rsquos), é um fator de risco para o desenvolvimento de celulite. 1,4,5 História pregressa de celulite, insuficiência venosa, presença de edema crônico ou drenagem linfática prejudicada dos membros, obesidade e uso de drogas injetáveis ​​também foram identificados como fatores de risco para celulite. 1,4,6

O diagnóstico de celulite geralmente é feito clinicamente.

Para celulite, a Infectious Diseases Society of America (IDSA) não recomenda a coleta de culturas de rotina, incluindo sangue, aspirados cutâneos, biópsias ou zaragatoas. 7 No entanto, hemocultura, exame microbiológico e cultura de aspirados cutâneos, biópsias e swabs podem ajudar na suspeita de patógenos atípicos. Esses procedimentos são recomendados pela IDSA em pessoas com estado de imunocomprometimento, lesões por imersão ou mordidas de animais. 7 A espera pelos resultados da cultura nunca deve atrasar o início do tratamento; no entanto, quando disponíveis, os resultados da cultura podem ser usados ​​para personalizar a antibioticoterapia.


15.1.2.2.2: Streptococcus pyogenes

Observe os cocos gram-positivos (roxos) em cadeias (setas).

Figura ( PageIndex <1> ): Strep. piogenes é beta-hemolítico. Ele pode quebrar completamente o sangue nas placas de ágar sangue, deixando apenas a cor do meio base (semelhante ao ágar nutriente ou ágar de contagem em placa). A hemólise é um método comum de distinção entre grupos de estreptococos. (Rebecca Buxton. 2005. https://www.asmscience.org/content/e. Ery / image.2881)

  • A faringite é causada pela morte de pessoa a pessoa, principalmente por gotículas respiratórias. As infecções cutâneas são transmitidas pelo contato direto com uma pessoa infectada ou por fômites (objetos inanimados contaminados).

Epidemiologia

  • Os estreptococos beta hemolíticos do grupo A são responsáveis ​​pela maioria das infecções estreptocócicas humanas agudas. Entre 5% e 20% das crianças são portadores assintomáticos. A infecção mais comum é a faringite com o organismo geralmente limitado às membranas mucosas e tecido linfático do trato respiratório superior. As crianças correm maior risco de infecção.
  • A infecção mais comum é a faringite (faringite estreptocócica) com o organismo geralmente limitado às membranas mucosas e tecido linfático do trato respiratório superior. Bolsas características de pus normalmente se formam nas amígdalas (pyogenes significa "produção de pus")
  • Da faringe, entretanto, os estreptococos às vezes se espalham para outras áreas do trato respiratório, resultando em laringite, bronquite, pneumonia e otite média.
  • Escarlatina:
    • acompanha faringite estreptocócica
    • erupção cutânea vermelha difusa começando no peito e se espalhando para o resto do corpo depois que a erupção desaparece, a pele descama
    • língua fica vermelha brilhante
    • causada por toxinas pirogênicas de algumas cepas
    • Certas cepas de S. pyogenes causar infecções invasivas por estreptococos beta do grupo A. A cada ano, nos EUA, ocorrem entre 750 e 1.500 casos de fasceíte necrosante, em que uma protease codificada por estreptococos chamada Exotoxina B destrói o músculo (miosite) ou a cobertura muscular (fasceíte necrosante).
    • S. pyogenes são introduzidos na pele comprometida (corte, arranhão ou outro ferimento)
    • Comumente chamada de & quot doença devoradora de carne & quot
    • Os sintomas iniciais incluem vermelhidão, inchaço e dor intensa no local da infecção
    • Os sintomas posteriores incluem pele distendida e descolorida, febre, náuseas, vômitos, pressão arterial baixa e confusão mental
    • Pode progredir extremamente rápido
    • O tecido afetado deve ser removido completamente e o paciente tratado com antibióticos de amplo espectro
    • Após a infecção inicial
    • Acredita-se que sejam doenças autoimunes causadas por anticorpos feitos contra antígenos estreptocócicos com reação cruzada de tecidos humanos
    • Febre reumática
      • Os anticorpos reagem com as membranas articulares e válvulas cardíacas
      • Os sintomas comuns são febre, dor nas articulações, sopro no coração, fadiga e pequenas saliências indolores sob a pele
      • Mais comum em crianças de 5 a 15 anos
      • Resulta em danos à válvula cardíaca ao longo da vida
      • Os anticorpos reagem contra as células glomerulares e as membranas basais dos rins
      • Os sintomas incluem pressão alta, baixo débito urinário e sangue e proteínas na urina
      • As crianças geralmente se recuperam completamente; os adultos podem ter danos permanentes

      Fatores de virulência primários

      • Igual a Staph. aureus, Strep. piogenes tem uma variedade de fatores de virulência, alguns dos quais (como as exotoxinas pirogênicas (que significa "geradoras de febre)) são encontrados apenas em certas cepas (Figura ( PageIndex <2> ))

      Figura ( PageIndex <2> ): Streptococcus pyogenes fatores de virulência. (2021 Jeanne Kagle)

      De Infecções por Streptococcus Grupo A, por Sat Sharma, MD, FRCPC, FACP, FCCP, DABSM, Diretor do Programa, Professor Associado, Departamento de Medicina Interna, Divisões de Medicina Pulmonar e de Cuidados Críticos, Coordenador de Sítio de Medicina Respiratória da Universidade de Manitoba, St Boniface Hospital Geral e Godfrey Harding, MD, FRCPC, Diretor do Programa de Microbiologia Médica, Professor, Departamento de Medicina, Seção de Doenças Infecciosas e Microbiologia, Hospital St Boniface, Universidade de Manitoba, Canadá.


      Aspectos regulatórios de biofilmes de GAS

      O estilo de vida do biofilme está associado a amplas mudanças transcricionais, afetando os níveis de expressão de cerca de 25% dos genes GAS (Cho e Caparon, 2005). Vários reguladores transcricionais mostraram-se envolvidos e cruciais para o estabelecimento e manutenção de biofilmes. A partir dos dados disponíveis até o momento, três processos regulatórios principais podem ser deduzidos que facilitam o estilo de vida do biofilme de GAS:

      (i) Detecção de quorum baseada em feromônio de peptídeo mediada pelos peptídeos hidrofóbicos curtos SHP2 / SHP3 (Chang et al., 2011).

      (ii) Repressão de enzimas secretadas e associadas à superfície, como a protease de cisteína SpeB e outras proteases e nucleases (Dmitriev et al., 2008 Roberts et al., 2010a Connolly et al., 2011a McDowell et al., 2012).

      (iii) Indução de estruturas autoagregativas e adesivas associadas à superfície, como proteínas semelhantes a M e M e os pilus codificados pela região FCT (Cho e Caparon, 2005 Luo et al., 2008 Manetti et al., 2010).

      Os principais participantes e a rede regulatória que contribuem para a formação de biofilme de GAS estão resumidos na Figura 2.

      Figura 2. Rede regulatória envolvida na formação de biofilme de GAS. As setas indicam indução direta ou indireta, as linhas bloqueadas indicam repressão direta ou indireta, as linhas tracejadas indicam exportação para fora da célula bacteriana e as linhas pontilhadas indicam efeitos ambíguos. Círculo externo (azul claro): nível de regulação da transcrição Círculo interno (azul escuro): fatores de virulência associados ao biofilme Externo: condições ambientais e peptídeos de detecção de quorum que influenciam o fenótipo do biofilme. & # x0201C? & # x0201D significa Regulador / mecanismo regulador desconhecido.

      Quorum Sensing

      Os mecanismos de detecção de quorum são cruciais para a formação de biofilme em muitos organismos. No GAS, quatro formas diferentes de comunicação inter e intraespécie são descritas, ou seja, processos dependentes de Rgg-, Sil-, lantibiotics- e LuxS / Autoinduer-2 (Jimenez e Federle, 2014).

      No GAS, a formação de biofilme está associada à detecção de quorum baseada em peptídeo-feromônio, mediada pelos feromônios SHP2 e SHP3 do peptídeo hidrofóbico curto (SHP). Esses feromônios peptídicos são codificados a jusante de dois genes que codificam para os reguladores transcricionais semelhantes a Rgg Rgg2 e Rgg3, respectivamente (Chang et al., 2011 Federle, 2012 Lasarre et al., 2013 Aggarwal et al., 2014). Os propeptídeos são secretados e processados ​​nos feromônios peptídicos maduros SHP2C8 e SHP3C8, que são absorvidos pelo GAS através do oligopeptídeo permease Opp. A transcrição de ambos os genes de feromônios peptídicos shp2 e shp3 é inibido enquanto Rgg3 estiver ligado aos respectivos promotores. SHP2C8 e SHP3C8 ligam-se a Rgg3 e Rgg2, levando a uma dissociação de Rgg3 e ligação de Rgg2 ao shp2 e shp3 promotores. Em um ciclo de feedback positivo, isso induz a expressão de shp2 e shp3 (Chang et al., 2011, Aggarwal et al., 2014). Em GAS M49 NZ131, foi demonstrado que a ativação dependente de SHP2 / 3 via Rgg2 induz a produção de biofilme, enquanto Rgg3 reprime biofilmes via repressão da produção de SHP2 / 3. Não se sabe até o momento quais alterações transcricionais são causadas pela ativação dependente de SHP2 / 3 de Rgg2 e inativação de Rgg3 que finalmente levam à formação de biofilme. Além disso, ainda não foi elucidado se este sistema também controla a formação de biofilme em outras cepas de GAS, mas em sílico análises mostram que Rgg2 e Rgg3 estão presentes em todas as cepas de GAS (Chang et al., 2011).

      Dois dos outros sistemas de detecção de quorum de GAS mencionados acima também foram associados ao estilo de vida do biofilme GAS. Para uma cepa M18, pode ser demonstrado que um mutante de deleção SilC foi significativamente prejudicado na formação de biofilme (Lembke et al., 2006). Além disso, há indícios de que LuxS está envolvido no controle da produção SpeB e emm expressão gênica, que poderia influenciar a formação de biofilme (Lyon et al., 2001 Marouni e Sela, 2003 Siller et al., 2008 Beema Shafreen et al., 2014). Ambos os últimos sistemas QS não foram investigados no contexto do biofilme GAS em detalhes ainda. Para obter mais detalhes sobre o sensor de quorum do GAS, consulte uma revisão atual de Jimenez e Federle (Jimenez e Federle, 2014).

      Reguladores da transcrição de SpeB e outras enzimas secretadas

      Uma vez que a atividade SpeB leva à dispersão de estruturas de biofilme e evita a formação de biofilme em GAS, a repressão de speB a transcrição é necessária para o estabelecimento de biofilme com sucesso (Doern et al., 2009). Portanto, os reguladores envolvidos na transcrição de speB também controlar a formação de biofilme em GAS. A regulação transcricional de SpeB é bastante complexa e envolve ações diretas e indiretas de diversos reguladores de GAS, conforme recentemente revisado por Carroll e Musser (2011). Reguladores positivos atuando diretamente no promotor do speB gene são RopB, outro membro da família do regulador Rgg também referido como Rgg1 (Chaussee et al., 1999 Neely et al., 2003 Dmitriev et al., 2008 Hollands et al., 2008), e o regulador do metabolismo do açúcar CcpA (Kietzman e Caparon, 2010 Shelburne et al., 2010). Consequentemente, a exclusão do ropB gene leva a diminuir speB expressão e um aumento da formação de biofilme como mostrado na cepa M49 NZ131 (Chang et al., 2011). Até onde sabemos, a influência do CcpA na formação do biofilme ainda não foi elucidada.

      O regulador de resposta CovR (também conhecido como CsrR) do sistema de dois componentes CovRS provavelmente se liga diretamente ao speB promotor também, atuando como um repressor transcricional (Miller et al., 2001). Consequentemente, a repressão de speB a transcrição por CovR permite a formação de biofilme GAS. A influência de CovRS na formação de biofilme parece ser dependente do sorotipo ou mesmo da cepa. Foi demonstrado que a deleção do sensor quinase CovS leva à diminuição da formação de biofilme na maioria das cepas testadas. No entanto, para algumas cepas M6, uma formação aumentada de biofilme foi observada em cepas de deleção de CovS (Hollands et al., 2010 Sugareva et al., 2010). Além disso, foi demonstrado que um mutante da cepa HSC5 sem o regulador de resposta CovR é incapaz de formar biofilme (Cho e Caparon, 2005).

      Outro regulador associado à virulência, Srv, está envolvido no controle de speB expressão via mecanismos indiretos (Reid et al., 2004 Doern et al., 2009 Roberts et al., 2010a Connolly et al., 2011a). A exclusão de srv na cepa M1T1 MGAS5005 leva a um aumento da atividade de SpeB e, portanto, à perda do fenótipo do biofilme (Reid et al., 2006 Doern et al., 2009). Em análises de Western Blot, SpeB não pôde ser detectado em biofilmes MGAS5005 após 24 h de crescimento, enquanto no srv deleção mutante grandes quantidades de SpeB estão presentes em culturas após 24 h de crescimento (Doern et al., 2009). A repressão da atividade de SpeB mediada por Srv não está restrita à cepa MGAS5005, que tem uma mutação de ocorrência natural que leva a um sensor quinase CovS inativo. Os efeitos de Srv em SpeB e produção de biofilme também foram observados para outras cepas de GAS, embora os efeitos de srv a deleção não é tão drástica nessas cepas quanto em MGAS5005 (Connolly et al., 2011a).

      Outro regulador potencialmente envolvido na formação de biofilme é CodY, um regulador envolvido na resposta à privação de nutrientes em muitas bactérias gram positivas (Sonenshein, 2005). Mutantes de deleção CodY mostraram ter uma capacidade reduzida de formação de biofilme de GAS em meio quimicamente definido (McDowell et al., 2012). Este efeito provavelmente também resulta da repressão indireta mediada por CodY da produção de SpeB e outras proteases secretadas e nucleases (McDowell et al., 2012).

      Regulação da transcrição de MSCRAMMS relevante para biofilme

      A regulação da transcrição de adesinas associadas à superfície de GAS tem sido sujeita a extensas investigações e as redes regulatórias têm sido frequentemente revisadas no passado (Kreikemeyer et al., 2003 Hondorp e McIver, 2007 McIver, 2009 Fiedler et al., 2010). No entanto, apenas alguns dos reguladores envolvidos foram investigados com relação ao seu impacto na formação de biofilme. Uma vez que a formação de biofilme está aparentemente associada ao pilus e à família da proteína M, é bastante óbvio que os reguladores transcricionais que influenciam a expressão dos genes do pilus codificados pela região FCT e os emm gene deve influenciar a formação de biofilme em GAS. Mga é o principal regulador positivo transcricional autônomo de emm e emm-like genes (Hondorp e McIver, 2007). Consequentemente, a inativação de Mga leva a uma perda da capacidade de autoagregação e formação de biofilme no GAS (Cho e Caparon, 2005 Luo et al., 2008). A regulamentação das Mga em si é muito complexa e foi revisada recentemente (Hondorp e McIver, 2007 Patenge et al., 2013).

      Para algumas cepas, ou seja, aquelas que abrigam uma região de codificação de pilus do tipo FCT-2, -3 ou -4, um dos principais sinais ambientais que direcionam a formação de biofilme é o pH externo, como mostrado exemplarmente para uma cepa FCT tipo 3 na Figura 3 Nessas cepas, a expressão do pilus é induzida sob condições ácidas. Em contraste, as cepas FCT-1 produzem biofilmes independentes do pH e não mostram quaisquer diferenças dependentes do pH na expressão do gene pilus (K & # x000F6ller et al., 2010 Manetti et al., 2010). O (s) regulador (es) que medeiam a expressão controlada pelo pH dos genes do pilus ainda não são conhecidos. É provável que os reguladores RofA-like codificados pela região FCT, RofA ou Nra, possam estar envolvidos, embora isso ainda não tenha sido provado experimentalmente (Kreikemeyer et al., 2002, 2011).

      Figura 3. Micrografias de varredura a laser confocal de 24 h emm3/ FCT-3 GAS cepa HRO-K-044 biofilmes cultivados em meio C alcalino ou acidificado. As células foram coradas com corante vivo / morto contendo Syto9 e iodeto de propídio. Ampliação 630 vezes o tamanho da caixa: 19,8 e # x000D7 19,8 e # x003BCm. Painel esquerdo: biofilme maduro cultivado em meio C com pH inicial de 8,5. Painel direito: biofilme maduro cultivado em meio C com pH inicial de 6,5. Fila superior: perspectiva 45 & # x000B0. Linha inferior: vista superior.

      Conclusão

      Sinais ambientais, como baixo pH e níveis críticos de feromônios peptídicos, iniciam circuitos reguladores complexos que levam à formação de biofilme no GAS. Os detalhes em gatilhos ambientais, mudanças transcricionais e reguladores envolvidos parecem ser específicos da cepa e não são completamente compreendidos ainda.


      Terapia antibiótica

      As escolhas de antibióticos para SSTI variam entre especialidades e instituições, refletindo diferentes populações de pacientes, localização anatômica, padrões de resistência, risco de MRSA (ver artigo anexo, p23) e política local.

      A orientação publicada é deliberadamente não prescritiva com relação à escolha do antibiótico, em parte refletindo essas complexidades, mas também porque os ensaios clínicos de SSTI geralmente excluem os pacientes mais gravemente enfermos e são alimentados apenas para mostrar a não inferioridade entre os agentes. 5,6

      Para pacientes internados em hospitais que requerem tratamento IV - e onde organismos totalmente sensíveis são isolados ou suspeitos e não há história de alergia à penicilina - antibióticos beta-lactâmicos de espectro estreito, como benzilpenicilina (para estreptococos beta-hemolíticos) e flucloxacilina (para ambos beta -estreptococos hemolíticos e estafilococos) permanecem os antibióticos de escolha. É prática do autor usar a monoterapia com flucloxacilina como tratamento de primeira linha para pacientes não alérgicos, a menos que haja suspeita de MRSA ou infecção polimicrobiana após a avaliação (ver Quadro 1).

      Quando a terapia oral é indicada, a flucloxacilina é apropriada e, para pacientes sensíveis a beta-lactâmicos, a eritromicina ou claritromicina, clindamicina ou doxiciclina (exceto durante a gravidez ou lactação e para crianças) são eficazes. Para pacientes com sensibilidade a beta-lactâmicos que requerem terapia IV, vancomicina ou clindamicina são geralmente selecionadas.

      Para adultos com infecções sexualmente transmissíveis graves que requerem terapia IV, é prática do autor, após a administração de uma dose IV inicial, usar uma infusão contínua de flucloxacilina (por exemplo, 12g / 24h) ou vancomicina (por exemplo, 2g / 24h), para fornecer o tempo máximo para o antibiótico ficar acima da concentração inibitória mínima para o organismo suspeito. O monitoramento de drogas terapêuticas deve ser realizado em pacientes recebendo vancomicina, visando uma concentração em nível aleatório de 10–15mg / L, com concentrações mais altas apropriadas para pacientes com bacteriemia por MRSA.

      Para pacientes com infecções necrosantes ou rapidamente progressivas, a clindamicina IV em uma dose de 900 mg a cada oitava é adicionada para aumentar a cobertura contra toxigênicos S pyogenes. A clindamicina reduz a produção da proteína de choque tóxico estreptocócica por sua ação nas mitocôndrias bacterianas. Também é ativo quando os beta-lactâmicos se tornam ineficazes, o que ocorre durante a fase de crescimento estático dos estreptococos, quando a produção da proteína de ligação à penicilina é interrompida.

      Se houver suspeita de infecção polimicrobiana, o espectro de cobertura com antibióticos deve ser expandido. Normalmente, para picadas infectadas, o co-amoxiclav (IV ou oral) é apropriado. A doxiciclina é uma alternativa oral adequada se o paciente for alérgico a beta-lactâmicos. Gentamicina, vancomicina e metronidazol podem ser considerados como alternativas, mas o conselho de um especialista deve ser procurado e a terapia ajustada dependendo dos resultados microbiológicos.


      Peptídeos Antimicrobianos Hospedeiros e Estratégias Contra Bacterianas

      Outros fatores importantes do hospedeiro são os peptídeos antimicrobianos que são componentes essenciais da primeira linha de defesa contra patógenos [53]. A catelicidina LL-37 mostrou fornecer proteção contra infecções necróticas de pele murinas causadas por S. pyogenes [54]. No entanto, várias bactérias patogênicas secretam fatores que podem degradar e inativar peptídeos antimicrobianos, como a cisteína protease estreptocócica SpeB [35, 55] e o inibidor estreptocócico do complemento [56].

      As análises das amostras de biópsia de tecido do paciente revelaram que o peptídeo LL-37 ativo estava presente em todas as amostras de biópsia infectadas e sua expressão estava positivamente correlacionada com a carga bacteriana [25]. Embora uma regulação positiva de LL-37 seja esperada em resposta à infecção estreptocócica [54, 57], tal correlação positiva com a carga bacteriana, juntamente com o fato de que existem bactérias viáveis ​​no tecido durante um tempo prolongado, implica fortemente que LL-37 no tecido infectado não contribuiu de forma eficiente para a morte bacteriana. Outros estudos revelaram que esta falta de atividade antimicrobiana foi provavelmente atribuída à inativação de SpeB de LL-37 na superfície bacteriana [25], de acordo com o modelo proposto por Nyberg et al [35]. Neste modelo, SpeB é aprisionado pelo complexo a2-macroglobulina-GRAB, alcançando assim um acúmulo de SpeB ao redor da bactéria, onde o significado biológico de uma inativação de LL-37 será maior.

      Está se tornando cada vez mais evidente que muitos dos peptídeos antimicrobianos atuam não apenas como agentes antimicrobianos, mas também como mediadores significativos de outros efeitos biológicos, incluindo atividades imunomoduladoras e quimiotáticas [53]. Considerando o estado hiperinflamatório dessas infecções teciduais graves, tais efeitos provavelmente exacerbariam as respostas patológicas e piorariam a progressão da doença. Além disso, um efeito potencial na virulência bacteriana foi sugerido por Gryllos et al [58], que relataram que as concentrações subinibitórias de LL-37 resultaram em expressão aumentada de vários fatores de virulência estreptocócica, incluindo cápsula, SpyCEP / ScpC e IdeS.


      Métodos Imunológicos em Microbiologia

      Maria M. Plummer, Charles S. Pavia, em Methods in Microbiology, 2020

      3.1 Características epidemiológicas e microbiológicas

      S. pyogenes está associada a muitas condições clínicas, incluindo faringite, escarlatina, febre reumática aguda e glomerulonefrite. É um coco Gram-positivo que forma colônias beta-hemolíticas quando cultivado em uma placa de ágar sangue. É catalase negativa - uma característica que rapidamente a distingue do grupo de bactérias estafilocócicas morfologicamente semelhantes, que também são Gram-positivas, mas são catalase positivas. É não móvel e não forma esporos e geralmente ocorre em cadeias ou pares e normalmente tem uma cápsula feita de ácido hialurônico. É um anaeróbio facultativo e cresce melhor em meio contendo sangue que foi incorporado ao ágar.

      A parede celular da bactéria é composta de unidades repetidas de N-acetilglucosamina e Nácido -acetilmurâmico. A identificação de estreptococos do Grupo A é baseada na reatividade sorológica de antígenos polissacarídicos da parede celular (como parte do esquema de classificação de grupo de Lancefield, originalmente desenvolvido por Rebecca Lancefield). A sensibilidade de S. pyogenes ao agente antimicrobiano, bacitracina, é útil para distingui-lo de outros estreptococos beta-hemolíticos, como S. agalactiae, que são freqüentemente encontrados em amostras clínicas. A cápsula de S. pyogenes resiste a fagocitose. Ele expressa uma proteína M e uma peptidase C5a do complemento que degrada esse peptídeo quimiotático. Na escarlatina, S. pyogenes secreta uma exotoxina pirogênica codificada por fago, via lisogenia, que causa febre e erupção cutânea. É mais provável que a febre reumática aguda pós-estreptocócica associada seja causada por anticorpos anti-estreptococos da proteína M e células T que apresentam reação cruzada com proteínas cardíacas, e que dão origem a uma variedade de anormalidades cardíacas.

      S. pyogenes é um patógeno frequente em humanos de todas as idades. Approximately 5–15% of normal individuals carry the organism, usually in the upper respiratory tract, without disease signs or symptoms. As part of the normal flora (now often referred to as the “microbiome”), S. pyogenes can cause a symptomatic infection primarily when there are compromised defences.


      ◗ Serodiagnosis

      Serological tests are of value in the diagnosis of AGN and rheu-matic fever. These tests detect high level of antibodies produced against many streptococcal antigens. The tests detecting anti-bodies against SLO (anti-SLO, or ASO antibodies) are most frequently used for confirming rheumatic fever and AGN. The ASO antibodies appear in serum 3–4 weeks after initial infection by S. pyogenes. A titer of more than 200 indicates streptococcal infections. Higher antibody titers are found in acute rheumatic fever, whereas they are not raised in patients with glomerulone-phritis and streptococcal pyoderma. Antibodies against other streptococcal enzymes, such as DNAase B (anti-DNase B anti-bodies), hyaluronidase (anti-hyaluronidase antibodies), and streptokinase (anti-streptokinase antibodies) are also demon-strated in S. pyogenes infecções. The demonstration of antibod-ies against these antigens may prove useful in the diagnosis of streptococcal pharyngitis and pyoderma.


      Assista o vídeo: Gram Positive Bacteria: Streptococcus Pyogenes (Janeiro 2022).